INVESTIGADORES
CHALON Miriam Carolina
congresos y reuniones científicas
Título:
La fusión EtpM-Enterocina CRL35 produce disipación del potencial de membrana en Escherichia coli
Autor/es:
CHALON M.C.; BARRAZA, D; ACUÑA, L; SESMA, F; MORERO, R.D; MINAHK,C.J; BELLOMIO, A
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofisica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofisica
Resumen:
Enterocina
CRL35 es una bacteriocina tipo pediocina (subclase IIa) producida por la
bacterica Gram (+) Enterococcus mundtii
CRL351. Altera la continuidad de la membrana plasmática que lleva a
la disipación del gradiente electroquímico y a la muerte celular2. Aunque
su mecanismo de acción no ha sido plenamente comprendido, se cree que las
bacteriocinas de este tipo podrían actuar por uno de los siguientes mecanismos:
1) se unirían a los fosfolípidos de la membrana e interactuarían con un
receptor proteíco específico integral de membrana para anclarse y formar poros
o 2) producirían un cambio conformacional en el receptor específico de membrana
que llevaría a la formación de un poro proteico. Las cepas productoras de las
bacteriocinas de clase IIa producen una proteína de inmunidad específica que
actúa desde el citoplasma para proteger contra su propia bacteriocina que actúa
desde el exterior sobre la membrana. Se ha demostrado que se forma un complejo ternario
bacteriocina-proteína receptora-proteína de inmunidad solamente en presencia de la bacteriocina
extracelular3.El objetivo de este trabajo es estudiar
si el anclaje en la membrana de enterocina CRL35 es suficiente para inducir la
pérdida de la integridad de la membrana plasmática y si la proteína de
inmunidad puede actuar aún en ausencia de la proteína receptora. Para ello dirigimos
la bacteriocina a la membrana celular desde el interior de Escherichia coli, fusionándola con la proteína de membrana EtpM
perteneciente al sistema de secreción tipo II de E. coli O157:H7. Observamos que la fusión EtpM-enterocina CRL35
produce la disipación del potencial de membrana en la cepa de E. coli BL21 y la inhibición del
crecimiento cuando se induce su expresión. Estos efectos son evitados cuando se
co-expresa la proteína de inmunidad MunC. Este resultado es sorprendente ya que
por primera vez se observó que enterocina CRL35 es capaz de actuar sobre
bacterias Gram (-) cuando se la ancla en la membrana citoplasmática y que la
proteína de inmunidad produce un efecto protector ante la acción de enterocina.
Ambos efectos en ausencia del receptor específico.