Reactividad cruzada en sueros de pacientes infectados con HIV -1 subtipo B y recombinante B/F

AMBROSIONI JC; ROMER Y; CEBALLOS A; PANDO MA; AVILA MM; RABINOVICH D; MARTINEZ PERALTA L

Buenos Aires

Congreso; VII Congreso Argentino de Virología; 2002

Introducción: La alta tasa de recombinación es un hecho ampliamente descripto en el virus HIV. Diversos estudios demostraron alta prevalencia de HIV-1 recombinante B/F en Argentina y otras regiones del Cono Sur en población heterosexual y en drogadictos intravenosos. Por otro lado en hombres que tienen sexo con hombres (HSH) la prevalencia es muy elevada para el subtipo B. La posibilidad de la reacción inmune cruzada entre dichos subtipos es de vital importancia para el desarrollo de estrategias de inmunización activa en la región. El V3 loop de la gp120 representa uno de los sitios más inmunogénicos y uno de los principales dominios neutralizantes del HIV-1. Objetivos: Caracterizar la reacción de sueros de individuos infectados con subtipo B o recombinante B/F frente a péptidos del V3 de HIV-1 correspondientes al subtipo B; F; y recombinante B/F. Materiales y métodos: se seleccionaron muestras de plasmas de 9 pacientes HSH caracterizados como infectados con subtipo B y 10 de MSH (mujeres que tienen sexo con hombres) caracterizadas como infectadas con recombinante B/F. La caracterización de las secuencias se llevó a cabo mediante secuenciación completa o bien por HMA (heteroduplex mobility assay). Los péptidos utilizados corresponden a los 15 aminoácidos centrales del V3 loop de cepas clásicas caracterizadas como B (MN), consenso F1 y un péptido de consenso local  B/F. La secuencia del consenso B/F fue obtenida por estudio de muestras de nuestro laboratorio previamente caracterizadas como B/F, también se incluyeron para dicha síntesis muestras caracterizadas como B, pero que evidenciaban residuos característicos de F en el V3. Se realizó el pegado de cada uno de los tres  péptidos en cantidad final de 0.2 ug por pocillo en microplacas IMMUNOLON de DYNATECH. Se realizaron ELISAs con dichas placas utilizando como conjugado anti IgG humana con peroxidasa  en dilución 1:200 y su substrato (Dakopatts). Resultados: se obtuvieron absorbancias promedio similares para ambos grupos (MSH y HSH) con el péptido MN (1034 error relativo (ER):86 contra 1017 ER:96, respectivamente); con el consenso F1 los valores fueron de 233 ER:7 para MSH contra 160 ER:15 para HSH; por su parte con el péptido recombinante B/F las absorbancias promedio fueron de 1396 ER:51 para MSH contra 581 ER:73 para HSH. En  7 de 9 HSH la absorbancia era mayor con el péptido MN que con el B/F mientras eso ocurrió en sólo dos de las MSH (p< 0.02 test exacto de Fisher). Conclusiones: La diferencia no significativa observada en las densidades ópticas obtenidas con el péptido MN con ambos grupos de sueros coincide con estudios previos donde MN demuestra la mayor tasa de reconocimiento de muestras. Sin embargo, se observa mayor reacción en los sueros de HSH con MN (subtipo B) y mayor reacción de MSH  frente al consenso B/F. De confirmarse estos resultados preliminares, esto podría traducirse in vivo en un comportamiento inmunológico diferencial. La reactividad diferencial frente a estos péptidos  podría ser de utilidad en  estudios epidemiológicos tendientes a determinar la dispersión de los recombinantes B/F.