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En este trabajo, se realizó la optimización del medio del cultivo en frascos agitados y la producción a gran escala en el biorreactor de tanque agitado de PHB por cepa nativa de Cupriavidus necator. Se ha explorado la variación de las condiciones de fermentación para aumentar el rendimiento de PHB. Con el fin de abordar la selección de los principales factores y optimizar el medio de cultivo, se diseñó un experimento basado en la metodología de la superficie de respuesta acoplada, con un diseño factorial completo. Se obtuvo una producción máxima de PHB de 4,6 g/l y una producción de biomasa de 6,5 g/l en condiciones optimizadas. A continuación se escaló la producción de polímeros hasta una fermentación batch de 6 l, en la que se obtuvo una biomasa significativamente mayor de 15 g/l con un contenido de 9,85 g/l de PHB y una productividad de 0,13 g/(l.h). Posteriormente se realizó la estrategia de fed-batch aplicando un procedimiento de tres etapas. La primera etapa consistió en un cultivo batch para permitir el crecimiento celular. En la segunda fase se realizó un cultivo fed-batch con la alimentación de fructosa (600 g/l), que se reguló en función de la concentración de oxígeno disuelto en el cultivo, con un corte del 70%. En estas dos etapas el NH4OH sirvió para regular el pH y también permitió evitar la limitación de nitrógeno. La tercera etapa consistía en un cultivo fed-batch con limitación de nitrógeno; la alimentación de fructosa se regulaba según el oxígeno disuelto con un corte del 30-20% y la base se sustituía por el NaOH. La producción máxima de biomasa era de 35 g/l con un contenido de PHB de 17,5 g/l. Finalmente un proceso de alimentación por lotes operado con una estrategia de alimentación exponencial en la segunda fase condujo a una producción máxima de biomasa de 52,1 g/l con un contenido de PHB de 27 g/l y una productividad volumétrica de 0,40 g/(l.h).

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