INVESTIGADORES
LAZARO MARTINEZ Juan Manuel
congresos y reuniones científicas
Título:
Polímeros catiónicos como agentes de transfección en fibroblastos fetales bovinos
Autor/es:
FORCATO D; ALUSTIZA F; FILI A; ALESSIO A; OLMOS NICOTRA F; RODRÍGUEZ N; BONGIOVANNI ABEL S; JUAN MANUEL LÁZARO MARTÍNEZ; BARBERO C; BOSCH PABLO
Lugar:
La Falda, Córdoba
Reunión:
Jornada; XIX Jornadas Científicas; 2013
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Córdoba
Resumen:
El objetivo fue evaluar la eficiencia de transfección y la toxicidad
de los polímeros catiónicos polialilamina (PAA) y polietilenimina
(PEI) en cultivos de fibroblastos fetales bovinos (FFB). Las
células fueron sembradas a una concentración de 3 × 104 células
en placas de 24 pocillos con DMEM/10% SFB. Diferentes
relaciones de PAA y PEI/ADN plasmidico (plásmido pZsGreen1)
fueron ensayadas (2:1, 1:1 p/p). El porcentaje de células que
expresaron la proteína verde fluorescente (GFP) se midió por
citometría de flujo 48 h postransfección. La viabilidad celular fue
determinada mediante MTT. Se halló un mayor porcentaje de
células GFP positivas con la proporcion 2:1 PEI:ADN comparado
con 1:1, usando 1μg de ADN (38.4±1.9% vs 13.5±1.4%).
Duplicar la [ADN] no mejoró la eficiencia de transfección
(38.4±1.9% vs 32.4±1.9%). El ensayo de MTT mostró una notable
muerte celular a 2 y 4 μg PEI (54.7 ± 3.4% y 18.5 ± 5.7% de
células viables, respectivamente). La transfección con 0.5 y 1
μg/pocillo de PAA fue marginal (menos de 3% de células GFP
positivas). Usando 2 μg ADN/2ug de polímero, el porcentaje de
células positivas con PAA fue significativamente menor que con
PEI (12.7±1.3 vs 32.4±1.9). Estos resultados indican que PEI es
superior a PAA como agente de transfección en FFB.
