NUEVO MÉTODO BIOAUTOGRÁFICO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE CONSERVANTES INHIBIDORES DE Mycobacterium: ESTUDIO DE ACEITES ESENCIALES DE ESPECIAS

RAMALLO, I AYELEN; GAGO, GABRIELA; FURLAN, RICARDO; GRAMAJO, HUGO

Rosario

Jornada; I Jornadas de Ciencia y Tecnología de la FBIOyF; 2021

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas UNR

IntroducciónCiertos microorganismos zoonóticos pueden ser adquiridos por el humano a través delconsumo alimenticio. Mycobacterium bobis es el agente etiológico de la tuberculosisbovina, en humanos presenta una clínica similar a la producida por M. tuberculosis.1 M.avium ssp. Paratuberculosis, es el agente etiológico de la enfermedad de Johne?s, unagastroenteritis en rumiantes, que se sugiere desarrollaría la enfermedad de Crohn enhumanos.2 Los antimicrobianos naturales están ganando cada vez más interés en laindustria alimenticia, que busca descubrir alternativas saludables a los compuestossintéticos. Las especias y sus aceites esenciales (AEs) se emplean como aromatizantespero muchos de ellos son antimicrobianas incluyendo como blanco Mycobacterium spp.3Los AEs son matrices complejas y hallar una molécula activa en un AE no es trivial. Eneste trabajo se reporta el desarrollo de un método autográfico simple para la detecciónde antimicobacterianos, y su aplicación en AEs.ResultadosSe empleó M. smegmatis por ser no patógeno y de crecimiento rápido. Para el desarrollose usaron placas de TLC Sílica Gel GF254 sembradas con 10 μg de isoniacida (INH). Seanalizaron las variables: concentración de LB-agar (1-2%p/v), volumen de LB-agar/cm2(0.13-0.20 mL/cm2), presencia/ausencia de tiloxapol, cantidad de inóculo inicial(DO=0.6, 2.5-6.3 μL/cm2), y tiempo de incubación (24-48 hs). La combinación defactores creó 18 ensayos que al término se revelaron con MTT. Respuestasexperimentales consideradas: A) diámetro del halo; B) contraste halo-matriz; C)homogeneidad de la matriz. Los resultados mostraron que: 1) no hay crecimiento a2%p/v de LB-agar; 2) la presencia de tiloxapol genera matrices más homogéneas; 3) >tiempo de incubación y cantidad de inóculo inicial genera > contraste halo-matriz; 4) a es el tamaño del halo ganando sensibilidad. Se eligió trabajar con: 0.13mL/cm2 de 1%p/v de LB-agar con 6.3 μL/cm2 de inóculo en tiloxapol. El límite dedetección para INH fue