BÚSQUEDA DE INHIBIDORES DE TIROSINASA EN EXTRACTOS QUÍMICAMENTE DIVERSIFICADOS CON HIDRACINA E HIDROXILAMINA

CASALONGUE, MATIAS; RAMALLO, I AYELEN; REYNOSO, GEORGINA; FURLAN, RICARDO

Rosario

Jornada; XV JORNADAS DE CIENCIAS, TECNOLOGÍAS E INNOVACIÓN; 2021

Universidad Nacional de Rosario

La metaloenzima tirosinasa (TYR) tiene un papel clave en la melanogénesis de mamíferos y en el pardeamiento enzimático en alimentos. La TYR cataliza dos reacciones secuenciales: hidroxilación de monofenoles y oxidación de difenoles a quinonas. Aunque la melanina tiene principalmente una función fotoprotectora en la piel humana, la acumulación de una cantidad anormal, más allá de un tema estético, se encuentra relacionado a diferentes patologías. Por su parte, la TYR es responsable de las reacciones de pardeamiento en frutas, verduras y hongos disminuyendo su valor comercial. Estos fenómenos incitan a la búsqueda de nuevos inhibidores para su uso alimenticio y medicinal. El objetivo de este trabajo es generar colecciones semisintéticas de compuestos y estudiar su potencial inhibitorio frente a TYR. Se sabe que los productos naturales (PNs) son puntos de partida evolutivamente validados para el diseño de fármacos. La diversificación química de extractos (DQE) explota la diversidad de esqueletos moleculares de PNs a través de la producción de nuevas moléculas semisintéticas mediante reacciones estratégicas. En este trabajo se realizó la modificación de 27 aceites esenciales (AEs) mediante reacción con hidracina monohidrato e hidroxilamina clorhidrato (NH2OH). Mediante ensayos en microplaca se efectuó la búsqueda de inhibidores de TYR de Agaricus bisporus. Los extractos activos luego se analizaron empleando bioautografía con el fin de adjudicar la actividad biológica observada en la mezcla a los componentes responsables de la misma antes de ser purificados. En base a estos resultados, se seleccionó el AE de Pimenta racemosa (Mill.) J.W. Moore modificado con NH2OH ya que presentó los mejores halos de inhibición de todo el set. Se purificaron los compuestos activos mediante cromatografía de columna en Sílica gel fase normal. Utilizando NMR (1H, 13C, COSY HMBC, HSQC), GC-MS, y HRMS, se efectuó la identificación de dos estructuras activas presentes en el AE de partida (eugenol y chavicol) y dos estructuras activas generadas por la reacción de modificación ya que se encontraban ausentes en el AE de partida (estructuras en estudio). Se continuará con la elucidación de estructuras, y se proyecta el estudio de las mismas con TYRs de origen vegetal y humano. Este trabajo es una prueba más que la DQE es una fuente eficiente de generación de nuevos futuros fármacos.