AVANCES EN EL DESARROLLO DE UNA VACUNA CONTRA LA ENCEFALITIS EQUINA VENEZOLANA MEDIANTE BIOINGENIERÍA DE PARTÍCULAS ?TIPO VIRUS? Y PROTEÍNAS SUPERFICIALES DE GIARDIA LAMBLIA

LUCIANA AGOSTINA FASSOLA; GUILLERMO ALBRIEU-LLINÁS; SERGIO R OMS; LUCIA L RUPIL; MARIANELA C SERRADELL

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virología; 2021

Asociación Argentina de Microbiología y Sociedad Argentina de Virología

El virus de la encefalitis equina Venezolana (VEEV) es un arboviruszoonótico de gran impacto sanitario y económico, capaz decausar cuadros febriles y neurológicos en equinos y humanos. Laúnica vacuna aprobada para equinos en países con circulación endémicaes la TC-83 y consiste en partículas infectivas atenuadasobtenidas a partir de una cepa epizoótica. Entre sus desventajasse destacan la posible reversión al fenotipo virulento y la propagaciónen la naturaleza. En nuestro instituto se desarrolló unaestrategia de vacunación basada en partículas similares a virus(virus-like particles, VLPs) decoradas con proteínas de superficiede Giardia lamblia (Variant-specific Surface Proteins, VSPs). Estaplataforma combina la inmunogenicidad de las VLPs con las propiedadesadyuvantes y protectivas de las VSPs. Como objetivonos propusimos obtener una vacuna segura y efectiva montandolos antígenos inmunodominantes del VEEV en este sistema y demostrarasí su adaptabilidad con diferentes modelos virales. Enprimer lugar, amplificamos los genes que codifican las glicoproteínasde interés de la cepa vacunal TC-83 y luego los clonamos envectores de expresión para células eucariotas. Con los plásmidosobtenidos transfectamos diferentes líneas celulares y verificamossu expresión mediante inmunofluorescencia y Western blotting.A su vez, para la inmunodetección generamos suero policlonalde ratones infectados con la cepa vacunal. Además, produjimosde manera recombinante la proteína E2 con un tag de histidina,para generar anticuerpos exclusivos contra este epítopo. Para laproducción de VLP-VSPs co-transfectamos una línea celular queexpresa establemente en su membrana la VSP, con dos plásmidos:uno que expresa el antígeno viral y el otro, la proteína Gagdel virus de leucemia murina que permite el ensamblado de lasVLPs. Actualmente estamos caracterizándolas y luego evaluaremossu efectividad como inmunógeno en modelo murino y su utilidadpara el diagnóstico serológico.