Estudio de la expresión de la mucina Muc1 en epitelios normales del gato doméstico (Felis catus) y su comparación con la MUC1 humana

EZEQUIEL LACUNZA; MARTÍN C. ABBA; AMADA SEGAL-EIRAS; MARÍA V CROCE

Tafi del Valle Mendoza Argentina

Workshop; XXV Annual Scientific Meeting; 2008

Asociación de Biología de Tucuman

Las mucinas constituyen el principal componente del mucus que recubre a los tractos digestivo, respiratorio y urogenital de los mamíferos. Son glicoproteínas expresadas en la superficie apical de las células epiteliales y constituyen un componente fundamental en la defensa de las mucosas. La  mucina 1, denominada MUC1 en los seres humanos y Muc1 en las especies no humanas, es una proteína de transmembrana expresada por la mayoría de los tejidos epiteliales de los mamíferos. Hasta el momento, es la mucina mejor caracterizada en el humano debido a que ha sido vinculada a numerosas enfermedades. Sin embargo, son pocos los datos concernientes a su expresión en otras especies. El objetivo de este estudio fue determinar el perfil de expresión de la Muc1 en tejidos epiteliales normales del gato doméstico (Felis catus). El dominio citoplasmático (CT) de MUC1/Muc1 se halla altamente conservado en la evolución. De acuerdo a esta hipótesis, se empleó el anticuerpo  policlonal CT33, desarrollado contra los últimos 17 aminoácidos de la MUC1CT humana. Se emplearon las técnicas de inmunohistoquímica (IHQ) y Western Blot (WB). Por otra parte, se aisló mRNA de páncreas de gato y de las líneas celulares humanas MCF7 y T47D (empleadas como control positivo de la expresión de MUC1) y se diseñaron un par de cebadores basados en la secuencia consenso producto del alineamiento de la región CT de distintas especies de mamíferos. Resultados: Mediante IHC, la presencia de la proteína Muc1 se observó en las células epiteliales del esófago, estómago, tráquea, pulmón, duodeno, colon, hígado, páncreas, glándulas salivales, glándulas mamarias lactantes y vejiga. El patrón de reacción, predominantemente lineal, así como la expresión ubicua de la Muc1 felina es compatible con lo hallado en tejidos humanos normales. Mediante WB, se halló una banda de 35Kda, correspondiente a la Muc1CT; el mismo patrón se observó en las líneas celulares humanas. El análisis mediante RT-PCR mostró un fragmento de 115pb, en coincidencia con lo hallado en MCF7 y T47D, lo que confirma el carácter conservado del dominio citoplasmático de la MUC1/Muc1 entre las distintas especies de mamíferos. Debido a las numerosas funciones adjudicadas a la mucina MUC1 en su relación con la protección de la mucosa, este estudio ofrece un modelo normal de la expresión de la Muc1 felina como punto de partida para evaluar y comparar la expresión de esta mucina en los tejidos patológicos del gato.