Identificación del dominio citoplásmico de MUC1 en el gato (Felis cattus)

E LACUNZA; M ABBA; A SEGAL EIRAS; MV CROCE

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2007

La mucina MUC1 es una glicoproteína de transmembrana expresada en la superficie apical de la mayoría de los epitelios; posee dos subunidades, la mayor constituye gran parte del dominio extracelular mientras que la subunidad menor comprende una pequeña porción del dominio extracelular, el dominio transmembrana y una cola citoplasmática (MUC1CT) de 72 aminoácidos rica en serinas y treoninas. Esta última está involucrada en la transducción de señales y se encuentra altamente conservada en los mamíferos. Con el objetivo de identificar el dominio citoplasmático de MUC1 en gato, se analizaron tejidos epiteliales de esófago, estómago, glándula salival, páncreas, hígado, glándula mamaria lactante, tráquea, pulmón, intestino delgado, colon y vejiga. Se utilizó el anticuerpo policlonal CT33 reactivo contra los últimos 17 aminoácidos de la MUC1CT humana. Métodos: inmunohistoquímica (IHQ), Westernblot (WB) y PCR-RT. Se aisló el ARN total de páncreas de gato, se sintetizó ADNc mediante la utilización de oligonucleótidos (dT) como cebadores y la enzima transcriptasa reversa M-MLV. Se utilizó la secuencia de ADN de la MUC1 humana para diseñar los cebadores de oligonucleótidos flanqueantes de la región terminal de la CT: MUC1F, 5´-ACA CCC ATG GGC GCT ATG T; MUC1R1, 5´-CTG CCA CTG CTG GGT TTG T. Mediante IHQ, se observó reacción en estómago, glándula salival, páncreas, hígado, glándula mamaria lactante, tráquea, pulmón, intestino delgado, colon y vejiga. Con WB, se observó una banda de reacción de 35KDa en estómago, páncreas, glándula mamaria y tráquea. Mediante RT-PCR se obtuvo un amplificado de 113pb correspondiente a la región terminal del dominio citoplasmático de MUC1 de gato. Este estudio permitió identificar y localizar por primera vez el dominio citoplasmático de MUC1 en gato; al igual que en otras especies de mamíferos descritas hasta el momento, el elevado grado de conservación sugiere un importante carácter funcional de este dominio.