Estudio de la expresión de dominios conservados de MUC1 y MUC5AC en tejidos epiteliales de mamíferos.

E LACUNZA; J BARA; A SEGAL EIRAS; MV CROCE

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2007

Los dominios ricos en cisteínas de MUC5AC y el dominio citoplasmático de MUC1 (MUC1CT) se encuentran conservados en los mamíferos. Objetivo: comparar el patrón de expresión de los dominios conservados de las mucinas MUC1 y MUC5AC en epitelios de diferentes especies de mamíferos. Materiales: Se emplearon muestras de esófago, estómago, intestino delgado, colon, glándula salival, páncreas, hígado, tráquea, pulmón, vejiga y glándula mamaria, obtenidas de humano, vaca, cerdo, gato, conejo y rata Se utilizó el anticuerpo policlonal CT33, dirigido contra MUC1CT humana y el anticuerpo monoclonal (AcMo) 45M1, reactivo contra el dominio cys 9 de la MUC5AC humana. Métodos: Inmuohistoquímica (IHQ), Western blot (WB) y dot blot. MUC5AC se aisló de homogenados de estómago y pulmón de rata, gato, cerdo y vaca mediante inmunoprecipitación en cromatografía de afinidad. Los complejos inmunes obtenidos se analizaron mediante WB. A fin de determinar si la reacción de 45M1 podía ser incrementada, se trató a las muestras con neuraminidasa de Chlostridium perfringens. Resultados: Mediante IHQ, CT33 reaccionó con la mayoría de los tejidos analizados; páncreas, estómago y glándula salival mostraron una reacción muy intensa en el 100% de las muestras. El AcMo 45M1 reaccionó en epitelio y secreciones gástricas y en células caliciformes de tráquea y pulmón. Mediante WB, con CT33 se evidenció una banda de aproximadamente 35KDa; con 45M1 se obtuvo una banda de 200KDa en secreciones de pulmón y estómago de rata, gato, cerdo y vaca. Con 45M1 se observó reacción más intensa en las muestras tratadas con neuraminidasa. Conclusiones: 1) CT33 presentó reacción en la mayoría de las especies analizadas.2) 45M1 reaccionó en estómago y células caliciformes de pulmón y tráquea de las especies incluidas.3) El peso molecular de MUC1CT fue de 35KDa 4) MUC5AC fue inmunoprecipitada y aislada de secreciones de estómago y pulmón 5) El tratamiento con neuraminidasa aumentó la expresión de MUC5AC con 45M1.