DETECCIÓN EN TUMORES DE MAMA DE LA ENZIMA INDOLAMINO-2,3- DIOXIGENASA INVOLUCRADA EN MECANISMOS DE TOLERANCIA INMUNOLÓGICA

ISLA LARRAIN M; RABASSA ME; LACUNZA E; BLAS Y; BARBERA A; CRETÓN A; TERRIER F; SEGAL EIRAS A; CROCE MV

Congreso; LVII ANNUAL SCIENTIFIC MEETING Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) LX ANNUAL MEETING Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2012

La Indolamino-2,3-dioxigenasa (IDO) es una enzima de 42-45 kD que cataliza la degradación del Trp, asociada a mecanismos detolerancia inmunológica. Está vinculada con la inducción de linfocitos T regulatorios y disminución de T activados. Se ha sugerido surelación con mecanismos de evasión tumoral.Objetivos: Determinar si la presencia de IDO en tumores de mama y exosomas derivados de ellos y en líneas celulares mamarias essignificativa en relación a muestras controles. Realizar un análisis in silico para determinar los genes asociados a IDO.Se analizaron 50 de pacientes con cáncer de mama; 22 controles benignos y normales; líneas de cultivo MCF7 y T47D. Se utilizóanticuerpo monoclonal anti-IDO (Millipore).Se halló reacción inmunohistoquímica positiva en el 44% de las muestras de pacientes con cáncer de mama y 25% de las muestrasbenignas, dando reacción negativa las normales. Las células de líneas tumorales presentaron reacción con un patrón citoplasmático.Mediante cromatografía en columna de exclusión molecular y ultracentrifugación diferencial se obtuvieron fracciones enriquecidasen exosomas a partir de plasma.Por Western blot, en 4/11 de las fracciones enriquecidas en exosomas obtenidos de plasma de pacientes se observó una banda de 42kD compatible con IDO.Se emplearon para el análisis in silico herramientas bioinformaticas basadas en Multiexperiment Matrix (MEM); las redes de interacciónproteína/gen mediante solapamiento de genes y estudio proteína/proteína por base de datos STRING.Los análisis in silico mostraron asociación de IDO con 2 clusters de genes relacionados con proliferación celular, respuesta inflamatoria,además de genes que participan en apoptosis.La presencia de esta enzima en los tumores de mama, en líneas de cáncer de mama y también en exosomas liberados por el tumorpermitirían inferir su papel en la generación de tolerancia inmunológica al tumor, por lo que esta enzima constituiría un estratégicoblanco terapéutico