EL ARN LARGO NO CODIFICANTE LINC0O0885 COMO POTENCIAL Na MODULADOR DE LA TRANSICIÓN EPITELIO-MESENQUIMAL A TRAVES DEL EJE PG63/MIR205 EN EL CANCER DE MAMA.

LACUNZA E; CANZONERI R; GURRUCHAGA A; BESSO MJ; VAZQUEZ-LEVIN, MONICA HEBE; ABBA MC

Jornada; XXXV Jornadas Multidisciplinarias de Oncología; 2022

Introducción y antecedentes: En un estudio previo identificamos al ARN largo no codifican-te (LncRNA) intergénico 885 (LINCO0885) sobreexpresado en carcinomas ductales in situ demama (DCIS) . Determinamos que induce proliferación, migración y cambios fenotípicos encultivos 3D de Íneas celulares de mama normal y DCIS. El análisis mediante RNAseq delLINCO0O885 sobreexpresado en las células MCF10 mostró activación de vías asociadas aEREG, EGFR, FOXM1 y TP63. Mediante ensayos de RNA-puledown seguidos de espectrome-tria de masas observamos que LINCO0885 no se une especificamente a ninguna proteína enparticular lo que, sumado a su localización predominantemente citoplasmática, le adjudica unposible rol como ARN endógeno competitivo (ceRNA) capaz de unirse complementariamentea MIRNAs.Objetivos: Identificar potenciales miRNAs asociados con el LINCOO885 que permitan aproximar su rol funcional.Materiales y Métodos: Análisis de coexpresión para el LINCOO885 y miRNAs asociados:(Método Pavlidis Template Machine) sobre datos de RNAseq y smalrRNAseq del TCGA—BRCA. Análisis de enriquecimiento funcional de genes coexpresados; FunRich y clusterProfileren R/Bioconductor. La validación experimental de las interacciones LncRNA-miRNA predicho insillco se efectuó mediante ensayos de ARN puledown seguido de Stem Loop RT-PCR sobre laInea T47D. Ensayos de silenciamiento del LINCOO885: se empleó la metodología de siRNA enÍneas celulares de cáncer de mama. El efecto del silenciamiento del LINCOO885 sobre genesepiteliales y mesenquimales: se evaluó mediante qRT-PCR en las líneas T47D y MCFZ.Resultados: El análisis de coexpresión del LINCOO855 sobre datos de RNAseq y smalkRNA-seq del TCGA en muestras de tejido normal adyacente al tumor, tumores y líneas celularesde cáncer de mama mostró evidencias significativas que sugieren una asociación delLINCO0885 con el miR-205-5p (R>0.6; p