LOCALIZACIÓN DEL LOCUS JUVENIL EN EL MAPA DE LIGAMIENTO GENÉTICO DE LA SOJA.

CARLOS A. CAIRO; MARÍA A. CHIESA; JUAN P. ORTIZ & ELIGIO N. MORANDI

SANTA ROSA, LA PAMPA, ARGENTINA

Congreso; XXV Reunión Argentina de Fisiología Vegetal (RAFV); 2004

SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL (SAFV)

LOCALIZACIÓN DEL LOCUS JUVENIL EN EL MAPA DE LIGAMIENTO GENÉTICO DE LA SOJA. Carlos A. Cairo1; María A. Chiesa1; Juan P. Ortiz2 & Eligio N. Morandi1 1Laboratorio de Fisiología Vegetal, 2Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Rosario, CC 14 (2125) Zavalla, Santa Fe, Argentina. Tel./Fax: (0341) 4970080-085-199. e-mail: ccairo@unr.edu.ar Los genotipos de soja [Glycine max (L.) Merr.] portadores del gen juvenil presentan "floración retrasada bajo condiciones de día corto" (Hardwig & Kiihl, 1979). La incorporación de este gen recesivo simple permite la obtención de cultivares aptos para siembras en bajas latitudes (< 20°), así como la ampliación del rango de latitud y de épocas de siembra a los que se adapta un cultivar convencional. La obtención de marcadores moleculares, MM, ligados al carácter juvenil facilitaría enormemente la selección asistida en un programa de mejoramiento orientado a la incorporación de este gen. De entre los MM, las repeticiones de secuencia simple, SSR, son particularmente adecuados para este fin. Los SSR son secuencias de ADN de 2 a 5 unidades de nucleótidos repetidas en tandem. Estas secuencias se encuentran distribuidas por todo el genoma de eucariotas y proveen la base para un sistema de MM unilocus y multialélicos basados en PCR (Cregan & Quigley, 1997). La existencia del mapa público de ligamiento genético integrado de soja, MPLG, con más de 1000 marcadores de SSR mapeados, permite posicionar en forma rápida un gen de interés, facilitar el clonado del mismo y potencialmente caracterizar su acción génica (Hegstad et al., 2000). El objetivo del presente trabajo fue emplear marcadores SSR contenidos en el MPLG para identificar la región genómica asociada al gen juvenil y así inferir el grupo de ligamiento, GL, donde se encuentra el mismo. Se utilizó un par de líneas cuasi isogénicas, LCIs, con, J, y sin, N, la característica juvenil y la correspondiente población segregante F2 (n = 31). Los loci SSR fueron seleccionados a partir del MPLG desarrollado por Cregan et al. (1999). En cada GL, el primer marcador SSR se seleccionó por su ubicación a una distancia máxima de aproximadamente 30 cM del telómero, los restantes marcadores se seleccionaron a una distancia máxima de aproximadamente 60 cM entre sí. En total se probaron 66 pares de oligonucleótidos cebadores. Los productos de amplificación fueron analizados en geles de poliacrilamida, y visualizados por tinción con nitrato de plata. El empleo de los cebadores oligonucleótidos específicos, generó en todos los casos patrones de bandeo correspondientes a locus simples que permitieron comparar la composición genética de los individuos J y N del par de LCIs. La mayoría de los marcadores reveló un patrón de banda monomórfico entre la pareja de LCIs. Sólo un marcador, Satt396-184, resultó polimórfico entre las isolíneas J y N, siendo la banda presente en el genotipo J, la de menor peso molecular. El marcador Satt396 se ubica en el GL C1 del MPLG. Otros tres marcadores SSR que se ubican próximos al Satt396 en dicho GL fueron ensayados. De estos sólo uno, Satt194, permitió la observación de un fragmento polimórfico, Satt194-102, siendo la banda presente en genotipo J la de menor peso molecular. El análisis de la F2 mostró que ambos marcadores polimórficos, segregaron según la relación 1:2:1 esperadas para un factor codominante. El marcador Satt396-184, resultó ligado al locus en estudio (c2 = 35,71) con una frecuencia de recombinación, p, de 0,22 ± 0,07. El marcador Satt194-102 cosegregó con el carácter juvenil (c2 = 30,94, p = 0,22 ± 0,07). La asignación del gen juvenil a un GL conocido a partir de la identificación de los marcadores SSR informados, puede ser empleado como punto de partida en estrategias destinadas al aislamiento y clonado del gen responsable del comportamiento juvenil. Bibliografía Cregan, P.B., et al. 1999. Crop Sci. 39:1464-1490. Hardwig, E.E. & Kiihl, R.A.S. 1979. Field Crop Res. 2:145-151. Hegstad, J.M et al. 2000. Crop Sci. 40:534-537.