“Hairy Roots de Lotus corniculatus como Modelos de la Respuesta a Estrés”

CHIESA, MARÍA A.; CUEVAS, J.C; SANNAZARO, A.; RUIZ, O.; SANCHEZ, D.

Rosario, Santa Fe, Argentina

Jornada; III Jornadas Regionales en Biotecnología. Fac. de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas de la U. N. R, Rosario; 2001

Fac. de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas de la U. N. R,

Hairy Roots de Lotus corniculatus como Modelos de la Respuesta a Estrés. Chiesa, M.A.; Cuevas, J.C.; Sannazzaro, A.; Ruiz, O.A y Sánchez, D.H IIB-INTECH (UNSAM-CONICET) Ruta circunvalación laguna, km 6. CC 164 (7130), Chascomús, Pcia. de Buenos Aires –Argentina. ruiz@intech.gov.ar El estrés abiótico se encuentra entre los factores más importantes que limitan la productividad agrícola, siendo el estrés salino aquel que en los últimos años ha recibido mayor atención. El mismo reduce la disponibilidad de agua -estrés hiperosmótico-, siendo este el responsable inicial de la disminución del crecimiento. Ante la reducción instantánea del potencial agua (Y), las raíces llevan a cabo rápidamente el ajuste osmótico y reestablecen el gradiente de Y, lo que permite nuevamente la absorción del agua y reestablece el crecimiento radical. Sin embargo, estos cambios son lentos en el vástago, resultando en una marcada disminución de su crecimiento. Es de interés tecnológico estudiar los mecanismos que generan esta diferencia de sensibilidad al estrés osmótico entre la raíz y el vástago. Con el objetivo de evaluar el sensado y la respuesta de las raíces al estrés salino, hemos propuesto como modelo el uso de cultivos de raíces transgenicas (hairy roots) que expresan un gen reportero (GUS) bajo un promotor de Arabidopsis thaliana inducible por estrés, el RD29A. Para ello, el promotor fue amplificado por PCR de genomico de Arabidopsis thaliana, clonado y subclonado en el plasmido binario pBi 101.1 (Clontech). Con la construcción pBi RD29A-GUS se transformo Agrobacterium Rhizogenes (Alain A4 WT), que sirvio para infectar plántulas de Lotus corniculatus. Resultados preliminares seran presentados con respecto a la caracterizacion bioquímica y molecular de clones independientes de hairy roots que expresan el gen reportero bajo condiciones de estrés abiótico. Agradecimientos: CONICET, TWAS y AECI.