Estudio de las interacciones proteicas del factor de virulencia de M. tuberculosis P36 (erp)

KLEPP, L; SANTANGELO, M. P.; ROMANO, M. I.; CATALDI, A.; BIGI, F.

Córdoba Capital

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007

Asociación Argentina de Microbiología

El gen P36 (erp) de Mycobacterium tuberculosis codifica para una proteína secretada de 36 KDa cuyo dominio central contiene varias repeticiones de los aminoácidos PGLTS. Ha sido demostrado que P36 es un factor de virulencia ya que la interrupción del gen impide el crecimiento de M. tuberculosis y M. bovis en ratón (Berthet, et al., 1998, Science Vol 282:75-62). Con el objetivo de dilucidar la función de P36, en un trabajo previo buscamos proteínas con capacidad de unirse a P36 mediante el screening de una genoteca de M. tuberculosis utilizando un sistema de doble híbrido en bacterias. Se obtuvieron dos ORFs cuyos productos interactúan específicamente con P36. Los mismos, llamados Rv1417 y Rv2617c, codifican para posibles proteínas de membrana y de transmembrana respectivamente. Estos resultados preliminares se confirmaron por ensayos de GST-pull down. Además también se demostraron las interacciones entre Rv1417 y Rv2617c, Rv1417 y Rv1417, Rv2617c y Rv2617c. En el presente trabajo se estudió, utilizando el sistema de doble híbrido en bacterias, que dominio de P36 se encuentra involucrado en la interacción con Rv1417 y con Rv2617c, pudiéndose observar que el dominio carboxilo no es necesario para la interacción de P36 con ninguna de éstas proteínas. Asimismo, se evaluó la interacción de los alelos  P36 de M. smegmatis y M. leprae con Rv1417 y con RV2617c, observándose  que Rv2617 sólo interactúa con alelos pertenecientes a especies del complex de tuberculosis, mientras que Rv1417 es capaz de interactuar además con el alelo P36 de M. smegmatis. Por otro lado, se ahondó en la caracterización de éstas proteínas y encontramos que Rv1417 y ribH, un gen que codifica para una probable sintetasa de riboflavina, se transcriben en forma conjunta, lo que indicaría que forman parte del mismo operón.