Caracterización de enzimas involucradas en la síntesis de glucógeno en bacterias del género Bacillus

FIGUEROA CM; IGLESIAS AA

Santa Fe

Encuentro; VI Encuentro de Jóvenes Investigadores de la UNL; 2002

UNL

En bacterias del género Bacillus se han aislado genes que codifican para proteínas involucradas en la ruta biosintética del glucógeno y se ha informado que la ADPGlc PPasa no estaría regulada alostéricamente y sería un caso particular de enzima bacteriana heterotetramérica. Sin embargo, estos estudios fueron realizados con técnicas de obtención de proteínas recombinantes en células heterólogas y no fueron confirmados con enzima purificada, ni con muestra obtenida directamente de células de Bacillus salvajes. La dilucidación de esto último es el objetivo principal del presente plan de trabajo. Se propone purificar la ADPGlc PPasa de Bacillus, tanto la enzima de la bacteria salvaje como la resultante de la expresión de los genes que la codifican en células heterólogas [ya se dispone de los genes (ej. los de B. stearothemophillus) y de un sistema de expresión de los mismos]. La enzima purificada de ambas fuentes (la proteína de células de Bacillus y la recombinante) se caracterizará en sus propiedades cinéticas, regulatorias y estructurales. Los resultados se compararán respecto a ambas enzimas purificadas; así como con la ADPGlc PPasa de otras fuentes bacterianas y vegetales.