Efecto de LPS y células apoptóticas sobre macrófagos peritoneales de ratones NOD prediabéticos: Modulación por VIP

LUCIANA LAROCCA; MARIO CALAFAT; VALERIA ROCA; ROSANNA RAMHORST; ANA FRANCHI; CLAUDIA PEREZ LEIROS

Córdoba, Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Los ratones diabéticos no obesos (NOD) constituyen un modelo adecuado de lasintomatología sicca semejante al Síndrome de Sjögren en humanos. A partir de las 12semanas (estado prediabético) muestran una pérdida progresiva de la función secretoria yuna respuesta Th1 espontánea contra las glándulas exócrinas. El VIP (péptido intestinalvasoactivo) es el neuropéptido más abundante del sistema inmune y por acción sobremacrófagos y linfocitos T polariza la respuesta hacia Th2. Previamente informamos quelos macrófagos peritoneales de ratones NOD presentan una mayor producción de nitritosy citoquinas Th1 frente a un estimulo inflamatorio como el LPS. El objetivo de estetrabajo consistió en estudiar la respuesta de los macrófagos peritoneales de ratones NODy controles BALB/c frente a un estimulo inflamatorio (LPS) y a células apoptóticas y elefecto de VIP en ambos casos. Se emplearon hembras de 16 semanas. Se incubaronmacrófagos peritoneales con LPS (10 ug/ml) o se realizaron co-cultivos con timocitos alos cuales previamente se les indujo apoptosis con dexametasona (10-6 M). La activaciónde NFkB en macrófagos se evaluó por microscopía confocal y western blot, IL-10 porELISA, la fagocitosis por tinción de hematoxilina eosina y la producción de nitritos porGriess. Se observó que los ratones NOD presentan translocación basal de NFkB y menorporcentaje de fagocitosis (X ± ES; BALB/c: 31.6 ± 0.8; NOD: 26.1 ± 1.1; P<0.05). ElVIP inhibió este efecto en ambas cepas. Asimismo, a diferencia de los macrófagosBALB/c, en los macrófagos de NOD el LPS no indujo la producción de IL-10. En el cocultivocon timocitos apoptóticos los niveles de nitritos aumentaron respecto del BALB/c,VIP disminuyó la producción de óxido nítrico solo en NOD (X ±ES; BALB/c: 6.2 ± 1.1;NOD: 26 ± 1.9; P<0.01; NOD: 26 ± 1.9, NOD+VIP: 16 ± 0.9; P<0.05). Los resultadosindican una activación alterada de los macrófagos NOD en el estado prediabéticocomparados con los BALB/c, con activación basal de NFkB, mayor producción de NO ymenor de IL-10 ante un estímulo inflamatorio como el LPS; y menor porcentaje defagocitosis y mayor producción de NO frente a células apoptóticas. El VIP inhibió a losmacrófagos ante ambos estímulos.