Fotodegradación de Gliclazida e influencia de HSA sobre dicho proceso. Detección de fotoproductos y su toxicidad.

CHALLIER, C; BEASSONI, PR; BOETSCH, C; LAURELLA, S; ALLEGRETTI, P; SABINI, C; SABINI, L; GARCIA, NA; BIASUTTI, MA; CRIADO, S

Buenos Aires

Congreso; XIX Congreso argentino de fisicoquímica y química inorgánica.; 2015

Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica

En recientes investigaciones, se ha develado el aspecto fisiológico de las especies reactivas de oxígeno (EROs). 1 Sin embargo, existen procesos de balance redox, que mantienen estas especies a concentraciones no tóxicas. Se sabe que bajo ciertas condiciones, este balance puede fallar y generar estrés oxidativo, el cual se encuentra fuertemente vinculado a enfermedades como diabetes mellitus.2 En este caso, la mayoría de los pacientes padecen diabetes mellitus de tipo II, la cual es tratada con medicamentos orales ó antidiabéticos (Andb) como Gliclazida (Gli). Por otro lado, se sabe que la albúmina de suero humano (HSA) es una proteína del suero que además de transportar una gran diversidad de medicamentos y compuestos, representa el principal componente antioxidante del suero. Por ello, teniendo en cuenta la posibilidad de que Gli y HSA se encuentren en microentornos comunes, expuestos a altas concentraciones de EROs, es que resulta interesante estudiar los procesos de degradación mediada por oxígeno singlete O2(1g), como arquetipo de las EROs. Se caracterizó la unión de Gli a HSA mediante estudios de fluorescencia y docking. Se observó la unión de Gli en dos sitios de HSA con constantes del orden de 105 M-1. Se realizaron estudios de fotodegradación sensibilizada por Perinaftenona (PN) de los sistemas Gli, Gli-HSA y HSA para evaluar el efecto de la proteína sobre el proceso degradativo. La velocidad relativa de consumo de oxígeno (vr) del sistema Gli-HSA indica una contribución aditiva de cada una de las especies. No obstante, el valor de la constante de velocidad de desactivación global de O2(1Δg) (kt) de este sistema muestra que la unión de Gli a HSA disminuye los valores de kt debido posiblemente a una reducción en la disponibilidad de los residuos Tyr de HSA que pueden desactivar físicamente a O2(1Δg) y que están involucrados en la unión con Gli. La identificación de productos de fotodegradación sensibilizada por PN de Gli mediante HPLC-Masa indica que Gli reacciona con tres moléculas de oxígeno, formando dos productos principales. El primero incorpora dos átomos de oxígeno al heterociclo con enlaces carbonilo y el segundo, cuatro oxidrilos distribuidos entre el anillo aromático y el heterociclo. La citotoxicidad de los productos identificados fue evaluada sobre cultivos celulares de células Vero. Los resultados revelaron la ausencia de toxicidad de los productos de degradación de Gli mediada por O2(1Δg). Por otra parte, PN resulta tóxico en concentraciones mayores a 5 μg/ml. De manera interesante, esta citotoxicidad resulta disminuida en presencia de Gli, el cual podría tener un efecto protector antioxidante en los cultivos celulares.