Interacción de HSA con antidiabéticos y su influencia sobre la degradación fotoinducida de la proteína

CHALLIER, C; BOETSCH, C; BEASSONI, PR; GARCIA, NM; CRIADO, S; BIASUTTI, MA

Cordoba

Workshop; IIGRAFOB: II Reunión de fotobiólogos moleculares argentinos; 2013

En las últimas décadas ha crecido notablemente el interés por estudios de procesos oxidativos que involucran tanto a macromoléculas de importancia biológica como a fármacos consumidos por el hombre. De hecho, recientes investigaciones1 han vinculado a enfermedades como diabetes miellitus, arterosclerosis e hipertensión a escenarios de estrés oxidativo en los que podrían tener lugar dichos procesos. Teniendo en cuenta que en la sangre el transporte de diversos compuestos y fármacos se realiza a través de la albúmina de suero humano (HSA), se considera de relevancia investigar la susceptibilidad a la degradación de dicha proteína unida al antidiabético Gliclazida (Gli), en condiciones de estrés oxidativo. Con el objetivo de caracterizar el sistema, se estudió la unión o binding de Gli a HSA. Los resultados, obtenidos mediante quenching de fluorescencia excitando en la región de absorción del aminoácido Trp, indican que Gli se une a HSA en dos sitios, con constantes de binding del orden de 104 para ambos. A su vez, estos resultados experimentales fueron confirmados por estudios de acoplamiento molecular (docking), los que permiten identificar el o los sitios donde un ligando (el antidiabético en nuestro caso) se une en la proteína y qué orientación asume en el sitio de unión. Finalmente, se estudió la fotooxidación de HSA mediada por oxígeno singlete (O2(1Δg)), en ausencia y en presencia de Gli. Los resultados indican que HSA es menos reactiva que Gli frente a O2(1Δg), mientras que el sistema HSA-Gli resulta más reactivo que cada una de las especies, individualmente. La interpretación más directa es la simple contribución aditiva a la desactivación de la especie oxidante, mientras que una segunda interpretación incluiría cambios conformacionales en HSA-Gli que favorezcan la accesibilidad de O2(1Δg) a los restos fotooxidables del sistema.