Efecto de la transdiferenciación exocrina-endocrina en células tumorales de adenocarcinoma pancreático ductal

MARÍA JIMENA MOSNA; LUCÍA PAULA PETRIZ OTAÑO; FEDERICO JULIÁN GARDE; MARCELO GABRIEL STINSON; DANIELA DI BELLA; ABEL LUIS CARCAGNO

Buenos Aires

Jornada; 21. XXXV Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto ?Ángel H. Roffo?; 2022

Instituto ?Ángel H. Roffo?

El adenocarcinoma pancreático ductal (PDAC) representa la cuarta causa de muerte relacionada alcáncer a nivel mundial. El elevado nivel de malignidad, dado por su gran capacidad metastásica,deriva en una baja tasa de supervivencia de los pacientes (9% a 5 años). Se sabe que la expresiónectópica de los factores de transcripción PDX1 y Neurog3 induce la transdiferenciación de lascélulas PANC-1 desde un fenotipo exocrino hacia uno endocrino “tipo beta”. Análisis de Kaplan-Meier muestran que los pacientes con tumores PDAC que sobreexpresan dichos factorespresentan una mayor tasa de supervivencia. Asimismo, la tasa de sobrevida es mayor en pacientescon tumores endócrinos pancreáticos en relación a pacientes con tumores de origen exócrino. Porlo tanto, el objetivo del trabajo fue analizar el efecto de la transdiferenciación exocrina-endocrinaen células PANC-1 respecto a su agresividad tumoral. Para inducir la transdiferenciación, lascélulas PANC-1 fueron tratadas con BRD7552 (inductor de PDX1) por 9 días o transfectadas con unplásmido de expresión hNeurog3. Las células tratadas mostraron una disminución significativa dela tasa de migración, evaluado por el ensayo de herida, y un aumento en la fase G1, observado porcitometría de flujo, respecto al control. Análisis de expresión de Ki67 por inmunohistoquímica nomostraron cambios en la tasa de proliferación celular. Por otro lado, células PANC-1 tratadasfueron implantadas en la membrana corioalantoidea del embrión de pollo y se analizó la tasa decrecimiento tumoral a diferentes estadios, observando una disminución significativa 7 días post-implante respecto al control. Ensayos de MTT y Trypan Blue demostraron que el BRD7552 nopresenta citotoxicidad en células PANC1 por lo que los resultados obtenidos no se deben a unadisminución de la viabilidad de las células tratadas. Adicionalmente, tanto la transdiferenciaciónmediada por BRD7552 o Neurog3 no generó cambios morfológicos en las células PANC-1. Análisisde bulk RNA-seq y RNA-seq de célula única identificaron genes asociados a parámetros clínicosdesfavorables en pacientes con PDAC y a la agresividad tumoral en células ductales pancreáticashumanas. En conclusión, la transdiferenciación mediada por BRD7552 afecta al ciclo celular einhibe la tasa de migración celular in vitro y el crecimiento tumoral in ovo en células PANC1. Estosresultados constituyen el primer paso de evaluación en el desarrollo de una terapia detransdiferenciación en PDAC.