Detección de mutaciones en enfermedades hereditarias

BONCAGNI, NATALIA; CARCAGNO, ABEL

Buenos Aires, Argentina

Jornada; IV Jornadas Departamentales. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. UBA; 2002

Departamento de Química Biológica

El 10% de los recién nacidos con hipotiroidismo congénito, poseen un defecto en la organificación del yodo (TIOD). La causa hereditaria (autosómica recesiva) más común de este defecto, es debida a la deficiencia de la Tiroperoxidasa (TPO) que cataliza tanto la oxidación como el acoplamiento de los residuos iodotirosílicos. El objetivo del trabajo fue realizar estudios genéticos de la TPO para caracterizar un caso de hipotiroidismo congénito y cretinismo que podría dar información sobre la estructura y función específica de esta enzima. Para ello se realizó la amplificación de los exones 1-13 por PCR a partir de DNA genómico. Los fragmentos amplificados fueron secuenciados y comparados con las secuencias informadas en el GENBANK y la mutación fue analizada por ensayos con enzimas de restricción. Se han identificado: A) Cuatro polimorfismos ya descriptos: exón 1 G11A, exón 8 G1207T y G1283C, exón 11 C2088T. B) Un nuevo polimorfismo en heterocigosis exón 11 G2086A que produce un cambio de D a N en la posición 666. C) Una nueva mutación en uno de los alelos exón 8 G1267T, que produce el cambio en la posición 393 de una G por un codón STOP también presente en la madre y un hermano del paciente. La mutación encontrada, explica en parte el TIOD, ya que evita la síntesis de una TPO activa, pero debe existir alguna variación en el otro alelo del paciente para explicar el fenotipo del mismo. El ensayo de digestión con la enzima DdeI podría ser utilizado como diagnóstico de presencia de la mutación