El posible rol del interactoma AQP1-ENaC en la permeabilidad al agua, estudiado sobre la membrana plasmática del ovocito de Xenopus laevis

COSTA ALMAR, FLORENCIA; GUTIÉRREZ, FACUNDO; DORR, RICARDO A.; OZU, MARCELO; TORIANO, ROXANA

Buenos Aires

Congreso; 4. Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2014

La AQP 1 es la proteína canal de agua mejor descripta de la familia de las aquaporinas. Sin embargo poco se conoce sobre las interacciones queeste canal puede llegar a experimentar en el entorno de la membranaplasmática. Nuestro trabajo de los últimos años se ha centrado en estudiarla influencia que diferentes factores de la estructura celular podríanejercer sobre la funcionalidad de la proteína. Así demostramos que ni lapresencia de un citoesqueleto intacto ni de citoplasma tienen relacióndirecta con la permeabilidad al agua (Pf) del canal. También probamosque la tensión de la membrana plasmática modifica Pf. El presente trabajoexplora la posible interacción funcional de AQP1 con ENaC, el canalepitelial de sodio. Ambas proteínas se expresan normalmente en lascélulas del endotelio vascular, entre otros tejidos. Se co-expresaron losdos canales en ovocitos de X. laevis y luego de probar que ambas siguensiendo funcionales, se estudió la respuesta del sistema frente a un shockhiposmótico. Los ovocitos expresando AQP1 ó AQP1+ENaC se incubaronen solución isoosmótica (ND20+150mM manitol=200 mOSM). No seobservaron diferencias significativas en el volumen absoluto de los ovocitosen ambas condiciones antes del shock (hipo25, hipo60 ó hipo150,modificando el contenido de manitol). Se observó que para los valoresde gradiente ensayados, los volúmenes relativos de ovocitos que coexpresanambos canales (n=5-12) aumentan significativamente (p<0,01)respecto de los que expresan solo AQP1 (n=10-13) a tiempos largos(250s). Al estimar los valores de Pf, observamos que los ovocitos que coexpresan ambos canales (n=5) expuestos al shock hipo60 muestran unapermeabilidad significativamente mayor (p<0,02) que los que expresansólo AQP1 (n=12). La Pf de los ovocitos que sólo expresan ENaC no fuesignificativamente diferente de la de los ovocitos control (inyectados conagua). Resultados obtenidos en presencia de amiloride indicarían un rolpara ENaC en la Pf del sistema.