Modulación Temprana Mediada por Especies Reactivas del Oxígeno y del Nítrogeno sobre la Apoptosis Radioinducida en el SNC en Desarrollo.

ROBELLO E; DUBNER D; PÉREZ MR; MICHELIN S; PUNTARULO S; GISONE P

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLVIII Reunión Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica-LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2003

El sistema nervioso central en desarrollo -SNCD- es exquisitamente sensible a la radiación ionizante. Las especies reactivas del oxígeno y nitrógeno -ERO/ERN- intervienen en procesos de amplificación a partir de los eventos iniciantes siendo la apoptosis la forma característica de la muerte radioinducida en el SNCD. Estudiamos la producción de ERO/ERN en cultivos de precursores neuronales irradiados in vitro y el rol de dichas especies en la modulación de la apoptosis. Los cultivos fueron irradiados con una dosis -Gamma- de 2 Gy. La generación de óxido nítrico -NO- fue estimada a través de nitratos y nitritos -NO3 + NO2- en el medio de cultivo. ERO/ERN fueron determinados por quimioluminiscencia dependiente de Luminol -QL- y el análisis de apoptosis se realizó con IP sobre la población sub-G1 a través de citometría de flujo. Expresando los resultados como irradiados vs controles los mismos son los siguientes: la apoptosis se hizo significativa a partir de las 4 hs pi alcanzando un máximo a las 24 hs pi - 36% vs 6%-. El contenido de NO2 fue significativo a partir de los 30´ postirradiación -pi- -0,12 vs 0,04 µmol/mg prot- con un máximo a los 360´ pi -0,43 vs 0,08 µmol/mg prot-. La QL mostró una disminución significativa entre 30´ y 60´ pi -1,18 vs 2,55 UA- y un incremento significativo a los 360´ -4,48 vs 1,10 UA. L-NAME -0,5 mM- incrementó la apoptosis a las 24 hs -43%- y generó un aumento en la QL del 167% a los 60´ y un descenso del 45% desde los 240´. El inhibidor de caspasa-3 zDEVD-fmk -20 µM- disminuyó la QL en un 54 % revirtiendo la apoptosis . Concluímos que el NO tiene un efecto neuroprotector temprano con un comportamiento bifásico de ERO/ERN y que el incremento tardío de los mismos es caspasa dependiente.