SONDAS BIOLÓGICAS BASADAS EN ANTIBIÓTICOS DESTINADAS AL ANÁLISIS DEL PERFIL DE SERIN-PROTEASAS DE TRIPANOSOMA CRUZI

MEDRAN, NOELIA S.; DELPICCOLO, CARINA M. L.; LA VENIA, AGUSTINA; LABADIE, GUILLERMO R.

Simposio; XXIII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2021

La enfermedad de Chagasy la leishmaniasis requieren urgentemente nuevos tratamientos farmacéuticos,más eficientes, menos tóxicos y económicamente asequibles. La identificación denuevas dianas biológicas, validadas sobre los parásitos correspondientes, T.cruzi y Leishmania spp, es esencial para el descubrimiento denuevos fármacos para el tratamiento de tales enfermedades. La actividadenzimática es un parámetro esencial en la comprensión de los procesosbiológicos. Los sistemas biológicos a menudo responden a los cambiosambientales alterando rápidamente la actividad de una enzima específica mediantediferentes mecanismos. Por lo tanto, el enfoque habitual para estudiar estoscambios midiendo los niveles de expresión de las enzimas no se correlacionanecesariamente con las actividades observadas. Recientemente ha surgido unnovedoso enfoque para estudiar el perfil enzimático utilizando inhibidoresirreversibles unidos a grupos detectables, conocidos como ?sondas basadas enactividad? (ABP, del inglés activity-based probes), cuyo fin es aislar eidentificar selectivamente proteínas de interés.a Hemos propuesto el diseño, la síntesis y el usoen sondas biológicas ABP basadas en antibióticos β-lactámicosb,c parael estudio de serín-proteasas en T. cruzi y Leishmania spp. Estassondas reaccionarán covalentemente con las serín-proteasas presentes en losparásitos, y luego las enzimas modificadas serán reveladas y aisladas medianteuna segunda etapa de conjugación con moléculas que presenten fragmentosdetectables o selectivamente aislables (Ver Esquema). La estructura general de lasABP incluye un inhibidor β-lactámico irreversible de serín-proteasas como laporción reactiva (warhead) y un conector que presente un grupo clickeable,el cual habilita la incorporación del fragmento detectable o etiqueta (porejemplo una molécula fluorescente o biotina y derivados). Siguiendo estosobjetivos se han sintetizado, purificado y caracterizado un pequeño conjunto deABP con núcleos β-lactámicos y funcionalidades alquino como el grupo clickeable.Además, se han obtenido las azido-etiquetas (N3-TAG) queactuarán como sus contrapartes, para el revelado y aislamiento de aquellasenzimas que hayan reaccionado con las ABP ensayadas.