INVESTIGADORES
APICHELA Silvana Andrea
congresos y reuniones científicas
Título:
PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS ANTI-RBD OBTENIDOS EN LLAMA (Lama glama) PARA POTENCIAL TERAPIA COVID-19
Autor/es:
SOLIZ SANTANDER. SE; STAGNETTO, A; PLOPER, D; TOMAS GRAU, RH; ÁVILA, C; CAZORLA, S; MALDONADO GALEANO, C; ARGAÑARAZ, MARTÍN E; APICHELA, SILVANA A.; PERDIGÓN, G; CHEHIN R; VERA PINGUITORE, E
Lugar:
San Miguel de Tucuman
Reunión:
Jornada; 38º jornadas científicas de la ABT; 2021
Institución organizadora:
ASOCIACION DE BIOLOGIA DE TUCUMÁN
Resumen:
A pesar de los esfuerzos mundiales para desarrollar diversos tratamientos para el SARS-CoV-2 la situación sigue siendo crítica, requiriéndose estrategias rápidas y eficaces. En este sentido, los anticuerpos (Ac) han demostrado potencial clínico. Dentro de éstos, una posible alternativa es el uso de nanoAc de camélidos (VHH), que pueden reconocer epítopes inaccesibles para los Ac convencionales. Otras ventajas sobre los Ac convencionales son su pequeño tamaño, alta solubilidad, elevada estabilidad y resistencia al bajo pH. En este trabajo se describe la purificación de distintos isotipos de inmunoglobulinas G (IgG) anti-SARS-CoV-2 producidos, luego de inmunizar 2 llamas (Lama glama). El plasma fue inyectado en una columna cromatográfica de afinidad (Proteína G), las fracciones colectadas fueron analizadas mediante SDS-PAGE en condiciones no reductoras y los títulos anti-RBD determinados mediante un ELISA ?in house?. Se obtuvieron títulos de 52000 y 13000 para las fracciones de IgG1 e IgG3 respectivamente. Posteriormente se preparó una columna de afinidad (HiTrap NHS-activated) para separar los Ac policlonales monoespecíficos anti-RBD. A esta columna se le acopló covalententemente RBD producido en nuestro laboratorio lográndose una eficacia de acople del 97%, obteniéndose los distintos isotipos de Ac monoespecíficos anti-RBD (IgG1140kDa e IgG395kDa). Estos últimos constituyen el punto de partida para los VHH y/o para evaluar su potencial uso como alternativa terapéutica o preventiva; lo que representa un notable aporte regional en la lucha frente al COVID-19.