VALORACIÓN BIOQUÍMICA Y PERFIL DE PROTEINAS DEL FLUIDO OVIDUCTAL DE ALPACAS

APICHELA, SILVANA A.; ARGAÑARAZ, MARTÍN E; ZAMPINI, RENATO; VENCATO, J.; PACHECO, C; RUIZ, JAIME; MICELI, DORA C.; STELLETTA, C

Arica

Congreso; VI Congreso Mundial Camélidos Sudamericanos; 2012

INCAS, Fac Cs Vet Univ. Chile, FIA

Introducción: En el oviducto de mamíferos tiene lugar el transporte de los espermatozoides, la fecundación y el desarrollo embrionario temprano. Estos eventos son posibles debido a que el oviducto provee el microambiente adecuado para que estos procesos ocurran. El fluido oviductal (FO) es una compleja mezcla de constituyentes derivados del plasma sanguíneo y de proteínas oviductales específicas; y su composición varía según el estado del ovario. Se conoce que la composición del FO de mamíferos varía entre especies. En los camélidos sudamericanos no existen datos publicados sobre la composición del FO. El conocimiento y valoración de los constituyentes del FO en camélidos es necesario para una correcta formulación de medios de cultivo específicos para el desarrollo de biotecnología reproductiva en esta especie. El objetivo de este trabajo fue caracterizar el FO de alpaca desde el punto bioquímico y conocer el perfil de proteínas del mismo. Materiales y Métodos: Se recolectaron muestras de aparato reproductor de hembras de alpaca pertenecientes a DESCO (Arequipa, Perú) y al matadero de Huancavelica (Perú). Según el estado del ovario, útero y fetos, las muestras se clasificaron en: hembras no preñadas (n=5), en primer bimestre de gestación n=10, y en segundo bimestre de gestación (n=10). Dentro de esta clasificación, los oviductos se separaron en: oviductos ipsilaterales al ovario con cuerpo lúteo, y oviductos contralaterales al ovario con cuerpo lúteo. Los oviductos de las hembras no preñadas no fueron separados, ya que no presentaron folículo dominante. Los oviductos fueron disecados a 5 ºC, y el FO se obtuvo insuflando aire con una pipeta y recolectando el FO por una suave presión de las paredes. Inmediatamente se centrifugó (800xg) para separar las células. Se analizó contenido total de proteínas y enzimas (albumina, globulina, creatina, urea, LDH, GOT, CK, GGT, GPT, fosfatasa alcalina), iones (sodio, potasio, cloruro, fósforo, calcio, magnesio), glucosa, colesterol y triglicéridos por métodos bioquímicos tradicionales. Para los valores de enzimas y proteínas, los datos se normalizaron estableciendo el contenido relativo, concentración / proteína total. Para el perfil proteico se realizó SDS-PAGE (resolución 12%) de cada grupo y se analizaron las bandas obtenidas con el programa GelAnalizer2010a. Resultados: El contenido relativo de albúmina fue significativamente mayor en hembras no preñadas mientras el de glucosa resultó menor. El contenido relativo de GGT aumentaría en el tercer trimestre mientras el contenido relativo de creatina disminuye en el tercer trimestre. En cuanto a los iones, los niveles del ión cloruro se encontraron disminuidos en hembras no gestantes, mientras los otros iones no presentaron variación. El análisis electroforético determinó en total 38 bandas de proteínas. Se observaron diferencias significativas (p