INVESTIGADORES
APICHELA Silvana Andrea
congresos y reuniones científicas
Título:
EXPRESION Y LOCALIZACIÒN DE MMP9 EN EL OVIDUCTO DE LLAMA
Autor/es:
ZAMPINI, RENATO; APICHELA, SILVANA A.; ARGAÑARAZ, MARTÍN E; ANGIONO, G; LOMBARDO, D; MICELI DORA C.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; III Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal ? INITRA; 2012
Institución organizadora:
INITRA
Resumen:
Las metaloproteasas (MMPs) han sido asociadas a la expansión del cúmulo, la interacción ovocito-espermatozoide y la fluidificación del semen. Se desconoce si el oviducto de camélidos sintetiza y secreta MMPs. Los objetivos del siguiente trabajo fueron determinar la secuencia completa del gen de MMP9 en llama, estudiar su expresión en el oviducto y localizar la proteina en los diferentes segmentos oviductales. Se trabajó con oviductos hembras de llama no lactantes, no preñadas pertenecientes al CEA-INTA Abra Pampa (Jujuy, Argentina), los que fueron procesados para obtención de ARN total o fijados en formol 10%-PBS e incluidos en parafina. Para determinar la secuencia de MMP9 se diseñaron cebadores a partir secuencias nucleótidicas ya conocidas de varios mamíferos y mediante RT-PCR a partir de ARN total se amplificaron, clonaron y secuenciaron los fragmentos obtenidos. Se estudiaron los niveles de expresión de MMP9 en ámpula, istmo, unión útero-tubal y papila del oviducto por qPCR. Para localizar MMP9 en el oviducto de llama se realizó inmunohistoquímica sobre los 4 segmentos oviductales con un anticuerpo policlonal contra MMP9 producido en conejo (dilución 1:100). En este trabajo se describe por primera vez la secuencia completa de MMP9 en llamas y su expresión en el oviducto. La MMP9 se expresa en todos los segmentos oviductales estudiados, no detectándose diferencia significativa en los niveles de expresión. La inmunomarcación se destaca a nivel del epitelio del oviducto, con cambios en la distribución del patrón de marcación en los distintos segmentos oviductales. En conjunto, los resultados indican que el oviducto de llama produce MMP9, la cual podría secretarse al lumen, sugiriendo una posible participación en los eventos reproductivos que tienen lugar en el oviducto.