Las células estromales de ganglios linfoides aumentan la sobrevida in vitrode linfocitos T y B

CAMICIA G; D LORENZO; BADANO MN; AF MAGLIOCO; SIACHOQUE N; CABRERA G; I PIAZZON; I NEPOMNASCHY

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

Los ratones mutantes para catepsina L(nkt) presentan altos números de linfocitos en los ganglioslinfoides (GL) que correlacionan con aumentos en los niveles deglicoproteínas de la matriz extracelular (ECM) (Lombardi y col,JImmunol. 174:7022, 2005). Con el objeto de investigar la influenciadel estroma de los GL en las poblaciones linfocitarias, seleccionamos células estromales (CE) -principales productoras de ECM- porcultivo a largo plazo de células adherentes de GL de ratones nkt(CEnkt) y wt (CEwt) (pasaje 11). La ausencia de marcadores de linajeendotelial, macrofágico y dendrítico (FACS), la morfologíafibroblástica y la expresión de mRNA para gp38 (RT-PCR) sugieren laobtención de fibroblastos reticulares. Evaluamos la influencia delas CE en la sobrevida y proliferación linfocitaria invitro cocultivando linfocitos de GL de ratones wt enpresencia o ausencia de CE wt y nkt. Determinamos los porcentajes deapoptosis y proliferación por marcación con ioduro de propidio yanálisis por FACS a 1, 2, 3 y 7 días de cocultivo. Aunque no seobservaron diferencias en los porcentajes de proliferación, lapresencia de CE disminuyó el porcentaje de apoptosis de célulasCD4+ y B220+, siendo mayor el efecto de las CEnkt. Ej. día 2 (media% hipodiploidía ±DS; n=3) células CD4+: CEnkt: 0,19±0,02; CEwt:2,42±0,7; sinCE: 13,3±1,5; CEnkt vs sinCE y CEwt vs sinCE p<0,005;CEnkt vs CEwt p<0,05. En células B220+: CEnkt: 2,08±0,03; CEwt:19,9±6,1; sin CE: 73,5±4,7; CEnkt vs sinCE p<0,005; CEwt vssinCE y CEwt vs CEnkt p<0,05. Ensayos de RT-PCR mostraronexpresión de mRNA para IL-7 en las CE. El medio condicionado de CEdisminuyó el porcentaje de apoptosis, aunque en menor proporciónque las CE, siendo el efecto del medio condicionado de CEnkt mayorque el del CEwt. Conclusión: las CE de GL incrementan la viabilidadde linfocitos TCD4+ y B220+ in vitro, efecto queestaría mediado en parte por factores solubles cuya síntesis y/oconcentración estaría incrementada en las CEnkt.td p { margin-bottom: 0cm; }p { margin-bottom: 0.25cm; line-height: 120%; }