LAS CÉLULAS ESTROMALES DE GANGLIOS LINFOIDES ALTERAN DIFERENCIALMENTE LOS NIVELES DE CÉLULAS T CD4+FOXP3+ Y CD4+FOXP3- IN VITRO

G CAMICIA; D LORENZO; G CABRERA; AF MAGLIOCO; I PIAZZON; I NEPOMNASCHY

Hotel 13 de Julio - Mar del Plata

Congreso; LII REUNION ANUAL de la Sociedad Argentina de Investigación clínica (SAIC) LV REUNION ANUAL de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) REUNION ANUAL de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2007

El cultivo de células estromales de ganglios linfoides (CCEG) -una valiosa herramienta para el estudio del rol de estas células en la fisiología del sistema inmune- resulta muy dificultoso, aunque se ha reportado la obtención exitosa de CCEG derivadas de ratones deficientes para la cadena beta del receptor para IL-2. Hemos demostrado que los ratones CTSLnkt (nkt), portadores de una mutación en el gen de la catepsina-L, presentan altos niveles de matriz extracelular en los ganglios linfoides. Dado que las células estromales son las principales productoras de matriz extracelular, estudiamos el comportamiento in vitro de células estromales derivadas de ratones nkt. Observamos importantes diferencias en el desarrollo de los CCEG derivados de ratones nkt y controles (BALB/c): mientras que los CCEG nkt llegan a confluencia en 20-30 días, los provenientes de ratones BALB/c crecen con gran lentitud y no llegan a confluencia al cabo de 2 meses de cultivo. En ambos casos, los fenotipos celulares fueron heterogéneos, presentando células con morfología fibroblástica y macrofágica/dendrítica. La presencia de macrófagos y células dendríticas, se confirmó por FACS utilizando los marcadores CD45, CD11b, CD11c y MHC clase II.Utilizamos entonces cultivos CCEG nkt para evaluar la influencia de los CCEG sobre las células CD4+Foxp3+ y CD4+Foxp3-. Linfocitos de ganglios BALB/c fueron estimulados con esplenocitos alogeneicos (AKR/J) en presencia y ausencia de CCEG nkt. La presencia de CCGE alteró las proporciones de células CD4+Foxp3+ y CD4+Foxp3-. A modo de ej: (Media del %Foxp3+/CD4+±DS, n=3) CCEG nkt: 22,0±1,7; Sin CCEG: 36,9±2,8; p<0,001. (Media del %Foxp3-/CD4+±DS; n=3): CCEG nkt: 67,2±0,4; Sin CCEG: 56,7±1,7, p<0,01. Estos resultados sugieren que el estroma de los ganglios linfoides ejerce un efecto diferencial in vitro sobre la proliferación y/o la sobrevida de los subpoblaciones CD4+Foxp3+ y CD4+Foxp3-.