Participación del factor inducible por hipoxia (HIF) en la regulación del sistema nitrírgico en placenta humana. Rol del sistema endocannabinoide.

ABAN C; LEGUIZAMÓN G; CELLA M; RAMIL V; FRANCHI A; MARTINEZ N; FARINA M

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

El factor inducible por hipoxia (HIF) es un factor de transcripción que juega un papel importante en la fisiología de la placenta. En nuestro laboratorio recientemente demostramos que los endocannabinoides pueden regular la actividad de la óxido nítrico sintasa (NOS) en placenta humana. En el presente trabajo, estudiamos el efecto del HIF sobre la actividad de la NOS e investigamos la participación del sistema endocannabinoide. Para ello, se utilizaron fragmentos de vellosidades coriónicas obtenidas de placenta a término (38-40 semanas de gestación) provenientes de mujeres con embarazos sin complicaciones,  luego de césareas electivas. Los explantos fueron incubados con medio solo, con AM251 (antagonista del receptor CB1), o cloruro de cobalto (CoCl2, 100-250 uM), un agente que estabiliza HIF provocando una hipoxia química. En primer lugar, se evaluó la expresión proteica de HIF luego de la incubación con CoCl2, as¨ª como la viabilidad de los explantos (MTT, hCG) bajo las condiciones de cultivo. Además, observamos que el tratamiento de los explantos placentarios con CoCl2 incrementa (p<0.01) la actividad de NOS. Por western blot detectamos que el incremento de HIF provocó una alteración en la expresión proteica de NAPE-PLD y FAAH, principales enzimas en las vías de síntesis y degradación de los endocannabinoides. Adicionalmente, detectamos que el efecto estimulatorio sobre la actividad de la NOS luego de la incubación con CoCl2 (p<0.001), revirtió  totalmente cuando los explantos fueron co-incubados con AM251. Demostramos que el incremento de HIF causa una desregulación de las enzimas NAPE-PLD y FAAH involucradas en la síntesis y degradación del sistema endocannabinoide, lo cual  sugiere que, en condiciones de hipoxia, el tono de los endocannabinoides aumentaría en la placenta. Adicionalmente, demostramos que el aumento de HIF incrementa la actividad de la NOS y que los endocannabinoides estarían involucrados en dicho efecto.