Estudio de la inmunogenicidad y la capacidad protectora de las lipoproteínas de Brucella spp

K. A. PASQUEVICH; S. M. ESTEIN; C. A. FOSSATI; G. H. GIAMBARTOLOMEI; J. CASSATARO

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XVII Congreso Latinoamericano de Microbiología; 2004

La brucelosis es una zoonosis causada por bacterias del género Brucella. Estas bacterias producen enfermedad en forma directa sobre humanos y atacan a otros mamíferos: bovinos, caprinos, porcinos y ovinos. La vacunación contra la brucelosis animal se realiza con vacunas vivas atenuadas, tales como B. abortus cepa 19 (bovinos) y B. melitensis Rev-1 (ovinos y caprinos). Sin embargo, la inmunización con cepas atenuadas no confiere protección total, puede producir abortos en el ganado preñado, genera dificultades para distinguir entre el ganado vacunado y el infectado por los test serológicos convencionales, puede enfermar de brucelosis a los humanos y las cepas pueden revertir a formas virulentas e infectar a los hospedadores vacunados. Por lo tanto sería preferible el empleo de vacunas acelulares, que no presentan estos inconvenientes. Las proteínas de membrana externa (Omps) de B. abortus, Omp16 y Omp19, son lipoproteínas y se encuentran expuestas en la superficie de la membrana externa de todas las especies del género Brucella. Estas características indican que Omp16 y Omp19 serían buenos candidatos para el desarrollo de vacunas acelulares. Se decidió estudiar la inmunogenicidad y la capacidad protectora de estas proteínas. Se obtuvieron las proteínas recombinantes (Omp16r y Omp19r) purificadas. Se inmunizaron ratones Balb/c con Omp16r, Omp19r, B. melitensis H38 muerta por calor o solución fisiológica (SF) en presencia de adyuvante de Freund incompleto, en 2 dosis cada 15 días. Un mes después de la última inmunización se desafiaron los ratones con B. abortus virulenta y luego de un mes se realizó el recuento de unidades formadoras de colonias (UFC) presentes en los bazos. La protección se evaluó como la reducción en unidades logarítmicas de las UFC con respecto al grupo control SF. El título de anticuerpos específicos en los sueros de los animales inmunizados se evaluó por ELISA. Las inmunizaciones generaron elevados títulos de anticuerpos IgG, alcanzando el día del desafío valores promedio de 1.330.000 (Omp16) y 222.000 (Omp19). Al momento del desafío existe una predominancia del título de IgG2a (270.000 y 480.000) con respecto a IgG1 (96.000 y 210.000) en los lotes inmunizados con Omp16 y Omp19, respectivamente. Estos datos sugieren que las respuestas generadas fueron del perfil Th1. Omp16 y Omp19 indujeron protección significativa (1,27 y 1,19 log de protección, respectivamente) frente a la infección (p<0.001). El control H38 indujo 1,61 log de protección. Por todo esto proponemos que las lipoproteínas B. abortus Omp16 y Omp19, serían buenos candidatos para el desarrollo de una vacuna acelular contra la brucelosis.