Modificaciones de la envoltura vitelina de ovocitos de anfibios por efecto de proteasas

MUSUMECI, HUMBERTO; BARRERA, DANIEL; LLANOS, RICARDO JAVIER; VALZ-GIANINET, JORGE NELSON; MICELI, DORA CRISTINA

Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia-UNT

Jornada; IIº Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores “A. Palavecino”; 2001

Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia-UNT

Se conoce que las proteasas oviducales de anfibios producen cambios en las glicoproteínas de la matriz extracelular de los ovocitos y que estos cambios serian los responsables de la capacidad fecundante adquirida por los mismos después de atravesar el oviducto. Considerando que la tripsina en bajas concentraciones puede simular la acción de las proteasas oviducales, de tal forma que los ovocitos celómicos (no fecundables) adquieren la capacidad de ser fecundados, se investigo si esta enzima es capaz de producir también modificaciones sobre envolturas aisladas. Empleando técnicas de microscopia de transmisión, se analiza la ultraestructura de la EV de ovocitos celómicos de B. arenarum (EVOC) luego del tratamiento con tripsina o fluido de PR.  Se efectuó también un estudio electroforético de los componentes proteicos de las EV aisladas, solubilizadas y luego tratadas con tripsina. El tratamiento de las EVOC con tripsina afecta a la proteína de 84kD 10 que desaparece al cabo de 180seg de tratamiento. Además la actividad de tripsina se manifiesta modificando los componentes con peso molecular entre 30 kD y 41 kD, dando como resultado un perfil electroforético similar al de la EV de ovocitos uterinos. Las imágenes al microscopio electrónico de ovocitos celómicos tratados con tripsina 0.001 % muestran que la EV al cabo de 60 segundos presenta modificaciones en los fascículos de fibrillas horizontales, con dispersión de los mismos y desaparición de los espacios característicos. Los fascículos perpendiculares a la superficie, aunque están presentes, se observan mas difusos y con menor grado de interacción con los fascículos horizontales. Es importante señalar que la cara interna de la envoltura muestra marcadas modificaciones luego del tratamiento con tripsina, desapareciendo la trama reticular y adquiriendo un aspecto difuso.