Estudio de la expresión de ovoquimasa 2 en tejidos de ratón y análisis de su secuencia mediante bases de datos moleculares

ABDULHAMID, M. BELÉN; BARRERA, DANIEL; VALDECANTOS, PABLO A.; MICELI, DORA C.

Fac. de Bqca., Qca, y Farm., Universidad Nacional de Tucumán. San Miguel de Tucumán, Tucumán

Jornada; IX Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores “Augusto Palavecino”; 2008

Fac. de Bqca., Qca, y Farm., Universidad Nacional de Tucumán

Las etiquetas de secuencias expresadas (EST) son secuencias nucleotídicas cortas obtenidas por análisis al azar de clones de bibliotecas de ADNc, las cuales se obtienen a través de secuenciación automática de los extremos 5´y 3´de dichas moléculas. Debido a que el ARNm deriva de genes que codifican proteínas, los ADNc y las EST obtenidas representan los genes expresados por las células y tejidos. Entre las bases de datos biológicas disponibles se encuentra la base dbEST, la cual representa una división del GenBank que contiene datos de secuencias ESTs de diferentes organismos. Por lo tanto, es posible recurrir a este tipo de información para iniciar estudios de expresión génica. Objetivo: El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión, en distintos órganos de ratón, del gen ovoquimasa 2 (Ovch2) que codifica para una proteasa evolutivamente relacionada con una enzima proteolítica denominada oviductina que está involucrada en la fecundación de anfibios. Materiales y Métodos: A partir de la comparación de la secuencia de Ovch2 con la base de datos dbEST se detectó una secuencia EST (n° acc. BB625475)obtenidad a partir de una biblioteca de ADNc de epidídimo de ratón correspondiente al extremo 5´del ARNm de Ovch2. Basándose en esta secuencia se diseñó un par de cebadores específicos y se aisló ARN total a partir de oviducto, ovario, útero, intestino, hígado, riñón, musculo, epidídimo y testículo de ratón de la cepa BALB/c. Resultados: Mediante la técnica de RT-PCR se amplificó un fragmento de 498 pb en las muestras de útero, epidídimo y testículo, mientras que no se detectó producto de amplificación en las otras muestras analizadas. Conclusiones: A partir de los resultados obtenidos se pudo corroborar la importancia de la información contenida en las bases de datos de secuencias EST y se proyectan hacer nuevos estudios para conocer la posible función de la Ovch2 en los órganos en los cuales se expresa.