Efecto de BMP-5 en el desarrollo de embriones bovinos producidos in vitro

GARCÍA, E. VANESA; BARRERA ANTONIO DANIEL; RIZO, GABRIELA; VALDECANTOS, PABLO A.; MICELI, DORA C.

San Miguel de Tucumán

Jornada; XXX Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2013

Asociación de Biología de Tucumán

Las Proteínas Morfogenéticas Óseas (BMPs) participan en la reproducción de mamíferos interviniendo en el desarrollo folicular en el ovario, regulando la implantación en el útero y la morfogénesis y organogénesis durante el desarrollo embrionario. En estudios previos demostramos que en el oviducto bovino, durante el ciclo estral, BMP-5 presenta una expresión diferencial en el istmo y está presente en el fluido oviductal. A fin de evaluar si el embrión temprano es un posible blanco de acción de este factor, los objetivos de este trabajo fueron: a) determinar la expresión de receptores específicos de BMPs (BMPR-IA, -IB y -II) en embriones bovinos y b) evaluar el efecto de BMP-5 sobre el desarrollo de embriones producidos in vitro. A partir de ovarios provenientes de matadero se obtuvieron por punción-aspiración ovocitos bovinos, los cuales fueron madurados y fecundados in vitro en condiciones estándares. Para el primer objetivo, los presuntos cigotos se cultivaron en medio CR1aa a 38,5°C, 5% CO2 y 100% de humedad hasta las 48 h postinseminación (hpi). Pooles de 20 embriones de 2, 4 y 8 células fueron colectados durante el cultivo y se procesaron para el posterior análisis de expresión de los receptores de BMPs por PCR en tiempo real. Para el segundo objetivo, los presuntos cigotos se cultivaron en medio CR1aa sin suero en ausencia o presencia de 100 ng/ml de BMP-5 a 38,5 °C, 5% CO2 y 100% de humedad. A las 48 hpi (día 2) se evaluó la tasa de clivaje y los embriones se transfirieron a medio CR1aa + 10% SFB para continuar el cultivo. Finalmente, en los días 7 y 8 se registró el número de blastocistos desarrollados. Como resultado se detectó la expresión de los 3 receptores de BMPs (BMPR-IA, -IB y -II) en todos los estadios embrionarios analizados. La presencia de BMP-5 en el medio de cultivo no produjo diferencias en la tasa de clivaje, sin embargo se alcanzó una mayor proporción de blastocistos con respecto al control. La expresión de los receptores de BMPs en el embrión bovino durante sus estadios tempranos y el efecto positivo de BMP-5 en el desarrollo de embriones producidos in vitro sugieren que BMP-5 podría actuar como un factor embriotrófico durante el desarrollo embrionario preimplantacional.