"EFECTO DE BIFIDOBACTERIAS SOBRE EL CRECIMIENTO Y LA ADHESIÓN DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE A ENTEROCITOS".

TREJO, FM, MINNAARD, J, PÉREZ, P.F, DE ANTONI, G.L

San Miguel de Tucuman-Argentina

Congreso; Simposio Argentino Italiano de Bacterias Lácticas; 2002

La acción benéfica de bifidobacterias a nivel intestinal estaría asociada en parte a la inhibición del crecimiento de microorganismos patógenos así como también a la capacidad de evitar o disminuir la adhesión al epitelio intestinal. El hecho de que Clostridium difficile sea un microorganismo típico de intestino grueso, hace que la formulación de productos a base de bifidobacterias para el tratamiento y/o prevención de diarreas asociadas a este microorganismo, constituya una alternativa al uso de antimicrobianos. El presente trabajo tiene como objetivos principales el estudio del efecto de factores extracelulares de bifidobacterias de origen humano sobre el crecimiento y la adhesión de C. difficile a enterocitos humanos en cultivo. Se utilizaron las cepas ATCC 9689 y 43593 de C. difficile, crecidas en BHI y distintas cepas de bifidobacterias aisladas de heces de neonatos crecidas en MRS. Los sobrenadantes de bifidobacterias se obtuvieron mediante centrifugación y filtración. En algunos casos fueron neutralizados a pH 7. Para los ensayos de adhesión se utilizaron enterocitos humanos diferenciados (células Caco-2/TC7, medio DMEM). Luego de preincubar 1 h con los sobrenadantes neutralizados, las suspensiones de C. difficile se incubaron durante 3 h a 37°C. Las bacterias adheridas se enumeraron por la técnica de Breed. El efecto sobre el crecimiento fue evaluado mediante ensayos de difusión en ágar. La concentración de ácidos orgánicos en el sobrenadante se determinó por HPLC. Se encontraron bifidobacterias altamente inhibitorias (ej. CIDCA 531, 532, 538, 5315, 5323 y 5326). No todas las bifidobacterias fueron efectivas contra ambas cepas de Clostridium. Las cepas altamente inhibitorias produjeron las mayores concentraciones de ácidos láctico y acético (láctico/acético = 0.86-4.65). Los sobrenadantes neutralizados de bifidobacterias altamente inhibitorias, modificaron la adhesión de C. difficile de una manera cepa-dependiente. No todas las cepas inhibieron la adhesión de ambos clostridios. Los sobrenadantes de algunas bifidobacterias produjeron un aumento de la adhesión de Clostridium difficile. Los resultados presentados muestran la capacidad de factores exocelulares de bifidobacterias de inhibir el crecimiento y la adhesión de C. difficile a enterocitos. Aunque no necesariamente los mismos factores exocelulares estarían involucrados en los procesos de inhibición de crecimiento y adhesión, algunas cepas presentan ambas propiedades.