Autoanticuerpos en portadores de tumor: su papel en la proliferación de células LM3 derivadas de un adenocarcinoma mamario murino

CATTANEO V, FISZMAN G, REARTE MB, DE LA TORRE E, DAVEL L, COLOMBO L, SACERDOTE DE LUSTIG E, SALES ME

Instituto de Oncología A. H. Roffo

Jornada; XX Jornadas Multidisciplinarias de Oncología Instituto A. H. Roffo; 2004

Instituto de Oncología A. H. Roffo

En pacientes oncológicos se han encontrado autoanticuerpos (autoAcs) contra proteínas sobreexpresadas (HSP, nucleares, etc). Sin embargo esta respuesta no es eficaz para eliminar el tumor. Hemos encontrado sobreexpresión de receptores muscarínicos (RM) funcionales en líneas celulares de adenocarcinomas mamarios murinos (LM3 y LM2) pero no en células mamarias murinas normales NMuMG. La  estimulación de estos RM, al activar enzimas acopladas como óxido nítrico sintasa, ciclooxigenasa y arginasa, promueve la proliferación celular, la angiogénesis y el crecimiento tumoral.  En consecuencia investigamos la presencia de autoanticuerpos (autoAcs) contra RM en portadores del tumor LM3. Observamos que el suero purificado de ratones BALB/c (2 mg/ml) portadores del tumor LM3 durante 14 días (Tch) estimula la proliferación de células LM3 en un 163,6±5,5% y este efecto se reduce por el pretratamiento de las células con atropina (AT)  10-6 M (99,1±8,5%). La fracción IgG purificada de los sueros Tch (0,025 mg/ml) fue igualmente potente para estimular la proliferación (165,4%)  y su efecto se redujo en presencia de AT   (64,4%)(p<0,05). Por otra parte el suero de portadores de 28 dias (TG) (2 mg/ml)  no modificó significatimante la proliferación de células LM3,  pero el agregado de AT evidenció una estimulación del 93,6% (p<0,05). La fracción IgG de TG inhibió la proliferación de LM3 un  37,3±8,6 % ;   la AT revirtió el efecto inhibitorio, estimulando la proliferación en un 46,7% (p<0,05).  Si bien el tratamiento con suero normal también estimuló la proliferación de células LM3 (45,8%) y el efecto disminuyó en presencia de AT (25,1%), el efecto estimulante de la IgG purificada de este mismo suero (63,2%) no se modificó significativamente en presencia de AT. Por ensayos de Western blot evidenciamos que los sueros de Tch y TG reconocen, tanto en homogenatos de tumor M3 como en lisados de células LM3,  una proteína  de 70 kDa que también es reconocida por una anticuerpo específico contra el receptor M2 y que se expresa mayoritariamente en células LM3. La inmunomarcación se reduce por el pretratmiento de las muestras con AT.   Concluimos que los portadores del tumor LM3  poseen autoAcs contra RM con disitnta actividad según el tiempo de portación, así mientras que estos autoAc estimulan el crecimiento tumoral en portadores tempranos, existiría una fracción  inhibitoria en portadores tardíos.