Regulación de transportadores apicales por espironolactona (E) en la línea celular Hepg2. Participación del receptor de pregnanos X (PXR).

RIGALLI JP; RUIZ ML; VILLANUEVA SSM; ARIAS A; PELLEGRINO JM; MOTTINO AD; CATANIA VA

Mar del Plata

Congreso; SAIC; 2009

El receptor nuclear PXR heterodimeriza con el receptor de retinoides X (RXRalfa) y media el efecto inductor de E sobre enzimas hepáticas de biotransformación. Los metabolitos de estos sistemas enzimáticos son excretados al canalículo biliar por proteínas transportadoras tales como MRP2, Pgp y BCRP. Se ha sugerido una regulación coordinada de los sistemas enzimáticos y las proteínas transportadoras. Nos propusimos evaluar el efecto de E sobre la expresión de transportadores apicales en la línea celular HepG2 derivada de hepatoma humano y la participación de PXR.Inicialmente, se trabajó con cultivo de células HepG2 wild-type y se evaluó el efecto de distintas concentraciones de E (0,5; 5 y 50 µM) o su vehículo (C) por 48 hs sobre la expresión de los transportadores apicales (por western blotting). A la máxima concentración de E, los resultados (C vs E 50 µM ), (unidades arbitrarias, media ± DE, n = 3, * p<0,05) fueron: MRP2 (138 ± 30 vs 183 ± 21), Pgp (568 ± 109 vs 878 ± 155 *) y BCRP (197 ± 28 vs 369 ± 46 *). Además, se evaluó la expresión de PXR y RXRalfa (por western blotting). Al comprobar que los niveles de PXR eran apenas detectables, se decidió transfectar con el plásmido pSG5-hPXR para lograr sobreexpresar dicho receptor. Las células transfectadas se expusieron a las mismas concentraciones de E o vehículo. A la máxima concentración de E observamos: MRP2 (204 ± 25 vs 360 ± 56 *), Pgp (263 ± 76 vs 621 ± 12 *) y BCRP (233 ± 16 vs 380 ± 39 *).Conclusión: la inducción de MRP2 por E requiere la presencia de PXR. Los bajos niveles basales de PXR son suficientes para que E aumente la expresión de Pgp; sin embargo, la sobreexpresión del receptor aumenta la respuesta al esteroide. La inducción de BCRP por E parece ser independiente de PXR. La activación de PXR por E produce una respuesta diferencial sobre los transportadores estudiados, afectando en forma selectiva la excreción de endo- o xenobióticos.