BIONANOPARTICULAS FOTOSENSIBILIZADORAS OBTENIDAS POR FOTOENTRECRUZAMIENTO DE LISOZIMA POR PUENTES DI-TIROSINA

FERNANDEZ, JUAN MANUEL; ABATEDAGA INES; REY VALENTINA ; BORSARELLI CLAUDIO D.

San Miguel de Tucumán, Argentina

Congreso; XVIII CONGRESO DE FISICOQUÍMICA Y QUÍMICA INORGÁNICA; 2020

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TUCUMAN

BIONANOPARTICULAS FOTOSENSIBILIZADORAS OBTENIDAS PORFOTOENTRECRUZAMIENTO DE LISOZIMA POR PUENTES DI-TIROSINARey Valentina1, Dorado Luis2, Abatedaga I1, Moran Vieyra, Faustino E.1, FernándezJuan M. 1, Borsarelli Claudio D.11 Instituto de Bionanotecnología del NOA (INBIONATEC), CONICET, Universidad Nacional de Santiagodel Estero (UNSE), RN9, Km 1125, G4206XCP, Santiago del Estero, Argentina.2 Facultad de Agronomía y Agroindustrias. UNSE. Av. Belgrano (S) 1912. 4200E-mail: valentinarey1@gmail.comIntroducción: las proteínas son las macromoléculas más abundantes y reactivas enlos sistemas biológicos. Los procesos de ?estrés? oxidativo traen como consecuenciauna gran variedad de modificaciones en la estructura de las proteínas que puedendisparar diversos procesos patológicos. Una de estas modificaciones involucra larecombinación de dos radicales tirosilos (Tyr) para generar el dímero covalente dityrosina (Tyr2), un cromóforo en el péptido capaz de absorber radiación UVB y emitirfluorescencia en el azul, y actuar como fotosensibilizador generando oxígeno singulete(1O2), una de las especie reactivas de oxígeno (ERO), con elevada capacidad difusivay oxidativa de diversas moléculas biológicas, lo que le confiere potencialesaplicaciones terapéuticas o de remediación.Resultados: se estudió el foto-entrecruzamiento de lisozima (LZ, 14.3 kDa, diámetrohidrodinámico dh = 4,11 nm) en buffer fosfato neutro utilizando el complejorutenio(II)tris-bipiridina ([Ru(bpy)3]2+) como fotosensibilizador con luz LED azul (462±14nm) en presencia de S2O82+ como donante electrónico sacrificial, para la generaciónprimaria de Tyr y por recombinación (Tyr2) (Figura 1A). La fotorreacción genera laprogresiva formación de oligómeros proteicos covalentes, los cuales se purificaronmediante una columna cromatográfica de intercambio catiónico HiTrap SP/HP y secaracterizaron mediante SDS-PAGE y dispersión de luz dinámica (DLS) (Figura 1B y1C), identificando la formación de bionanopartículas (dh = 6-14 nm) con PM múltiplosde LZ monomérica (ej: LZ2, LZ3,?, LZ6). Estas bionanopartículas al ser irradiadas conUVB (320-370 nm) generan 1O2 con un 20% de rendimiento cuántico. Conclusiones: se utilizó una reacción de fotosensibilización con luz visible paragenerar oligómeros de LZ nanoscópicos y solubles unidos por puentes Tyr2, que a suvez al ser irradiados con UBV son bionanopartículas fotosensibilizantes.