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ObjetivoEn el presente trabajo se determinó el contenido de extracto seco de Ginkgo biloba (Ginkgo), Panax ginseng (Ginseng) y Paulinia cupana (Guaraná) en comprimidos recubiertos.Materiales y Métodos1. Determinación de extracto seco de Ginkgo en comprimidos recubiertos. Marcador utilizado: Canferol (aglucón flavonoide).Condiciones cromatográficasFE: C18 Luna Phenomenex 250 x 4.6 mm (5 µm). FM: metanol, agua y ácido ortofosfórico (100:100:1). Detector: 370 nm. Flujo: 1,5 mL/min.Volumen de inyección: 20 µL. Solvente de extracción: etanol, ácido clorhídrico y agua (25:4:10)Preparación de la solución estándar de Canferol (marcador): Preparar una solución de Canferol de 0,1 mg/mL. Disolver en 80 % de solvente de extracción y luego llevar a volumen con agua.Preparación de la soluciones placebo, extracto materia prima y muestra:Pesar en forma exacta alrededor de 7540 mg de placebo de extracto de Ginkgo, 150 mg de extracto de Ginkgo materia prima y 7690 del polvo de los comprimidos (equivalente a aproximadamente 150 mg de extracto de Ginkgo materia prima) por separado y a cada uno colocarlos en un balón de 250 mL. Agregarle 40 mL del solvente de extracción y someter a reflujo durante 135 minutos. Dejar enfriar a temperatura ambiente. Transferir a un matraz de 50,0 mL. Llevar a volumen con agua. Homogeneizar la solución resultante. Filtrar por membrana de 0.45 µ de diámetro de poro. 2. Determinación de extracto seco de Ginseng en comprimidos recubiertos. Marcador utilizado: Rb1 (ginsenósido)Condiciones cromatográficasFE: C18 Luna (2) Phenomenex ® 250 x 4.6 mm (5 u). FM: constituida por una mezcla variable de las soluciones A y B según el gradiente descrito a continuación. Solvente A:Agua. Solvente B: Acetonitrilo:Agua (8:2).Gradiente: 76 % de A durante 12 min (isocrático); de 76 % a 65% de A de 12 min a 28 min; de 65 % a 57 % de A de 28 min a 52 min. Detector: 203 nm. Flujo: 1,5 mL/min. Volumen de inyección: 20 µL. Diluyente: Preparar una mezcla de agua y alcohol (6:4)Preparación de la solución estándar de Rb1 (marcador): Preparar una solución de 0,2 de mg/mL del ginsenósido Rb1 en diluyente.Preparación de la solución de placebo, extracto materia prima y muestra: pesar en forma exacta alrededor de 1600 mg de placebo, 80 mg de extracto seco materia prima de Ginseng y 1680 mg del polvo de los comprimidos (equivalente a aproximadamente 80 mg de extracto de Ginseng materia prima) y por separado y a cada uno colocarlos en un matraz de 10,0 mL. Agregar 8 mL de diluyente. Someter a la acción de un baño de ultrasonido durante 10 min. Llevar a volumen con diluyente. Homogeneizar la solución resultante. Filtrar por membrana de 0.45 µ de diámetro de poro.3. Determinación de extracto seco de Guaraná en comprimidos recubiertos. Marcador utilizado: Cafeína (base xántica) Condiciones cromatográficasFE: C18 Luna (2) Phenomenex ® 250 x 4.6 mm (5 u). FM: agua y metanol (75:25). Detector: 272 nm.Flujo: 1,0 mL/min.Volumen de inyección: 20 µl.Preparación de la solución testigo de cafeína: Preparar una solución de 0,015 de mg/mL de cafeína en fase móvil.Preparación de la soluciones placebo, extracto materia prima y muestra: pesar en forma exacta alrededor de 1030 mg de placebo; 50 mg de extracto seco materia prima de Guaraná o 1080 mg del polvo de los comprimidos (equivalente a aproximadamente 50 mg de extracto de Guaraná materia prima) y colocarlos en un matraz de 100,0 mL y por separado y a cada agregarles 80 mL de fase móvil. Someter a la acción de un baño de ultrasonido durante 15 min. Llevar a volumen con el mismo solvente. Homogeneizar. Filtrar. Tomar 4,0 mL y colocarlos en un matraz de 100,0 mL y llevar a volumen con fase móvil. Homogeneizar la solución resultante. Filtrar por membrana de 0.45 µ de diámetro de poro.Los métodos utilizados se validaron según los parámetros requeridos para la validación de métodos analíticos de la Categoría I de la Farmacopea Argentina VII ED. Capítulo .La selectividad y la pureza de pico se analizaron mediante la comparación de tiempos de retención y espectros ultravioleta con los compuestos de referencia. Los espectros ultravioleta se analizaron a tres niveles (comienzo, medio y final) de cada pico investigado y demostraron ser comparables.La precisión intraensayo se analizó (repetibilidad n=10) resultando el desvío estándar relativo (DSR) de 0.9 % para el canferol, de 1.4% para el ginsenósido Rb1y de 0.57% para la cafeína. La linealidad y la exactitud se estudiaron en un rango entre el 80 % y el 120 % para los marcadores de cada extracto (0.08 mg/mL-0.12 mg/mL para el canferol; 0.16 mg/mL-0.24 mg/mL para Rb1 y 0.012 mg/mL- 0.018 mg/mL). Se obtuvieron los siguientes valores de pendiente, ordenada al origen y coeficiente de correlación (R2), respectivamente: 3840 ± 3249, 14.80 ± 131.30 y 0.9997 para el canferol; 54.10 ± 22,30, 42,43 ± 339.20 y 0.9998 para el ginsenósido Rb1; -160.00 ± 64.02, 41,60 ± 457.60 y 0.9999 para la cafeína. Respecto de la exactitud, los porcentajes de recuperación obtenidos utilizando el método del estándar agregado (n=6) fueron de 98.9 % para el canferol; 98.6 % para el ginsenósido Rb1 y 99.3 % para la cafeína. ResultadosLos métodos utilizados resultaron adecuados para el análisis cuali-cuantitativo de los extractos secos de Ginkgo biloba (Ginkgo), Panax ginseng (Ginseng) y Paulinia cupana (Guaraná) en comprimidos recubiertos.

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