Liberación de clorhexidina desde sustratos de Ti-Poliacrilato en cultivos de osteoblastos: influencia de la concentración de clorhexidina sobre la actividad celular

M. CECILIA CORTIZO; TAMARA G. OBERTI; M. SUSANA CORTIZO; MONICA FERNÁNDEZ LORENZO DE MELE; ANA M CORTIZO

Los Cocos, Cordoba

Simposio; XLIII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Odontológica; 2010

Los implantes dentales de Titanio (Ti) son susceptibles a la contaminación por biopelículas bacterianas. Las películas de poliacrilatos de bencilo (PAB) conteniendo clorhexidina (CLH) han demostrado ser eficaces para reducir la adherencia microbiana, aunque se desconoce su biocompatibilidad. OBJETIVO: Evaluar el efecto de la presencia de Ti, Ti-PAB y Ti-PAB-CLH con distintas concentraciones de CLH sobre la actividad celular de un cultivo de osteoblastos. MATERIALES Y MÉTODOS: Se usaron muestras de Ti grado 1 y muestras Ti-PAB y Ti-PAB-CLH preparadas por casting de cloroformo. Se emplearon sustratos de Ti, Ti-PAB y Ti-PAB-CLH con concentraciones de CLH de 0,35 - 0,7 y 1,4 %  p/p como agente antimicrobiano. Los sustratos estériles se depositaron dentro de pocillos de cultivo de 5 cm2 (wells). Se plaquearon células osteoblásticas de la línea UMR 106 que se cultivaron por 24h. Las células adheridas a los sustratos se evaluaron por fluorescencia directa (tinción naranja de acridina). Las células remanentes adheridas al well de cultivo se tiñeron con Giemsa y se evaluó su número, morfología celular y actividad de fosfatasa alcalina, un marcador de diferenciación osteoblástica. RESULTADOS: Las células sobre el well cultivadas en presencia de 0,7 y 1,4 %  de Ti- PAB-CLH mostraron alteración de la morfología celular normal (encogidas, picnóticas, con pérdida de extensiones citoplasmáticas) compatible con efectos citotóxicos. Se detectó un importante número de células muertas por apoptosis/necrosis en los cultivos crecidos sobre los sustratos con altas concentraciones de CLH, así como una marcada disminución de la  actividad de la fosfatasa alcalina en los extractos de las células crecidas sobre los wells. No se  encontraron diferencias significativas entre los cultivos realizados con Ti, Ti-PAB y Ti-PAB-CLH en sus concentraciones más bajas. En cambio, se observaron diferencias significativas entre el control y el Ti- PAB-CLH con la mayor concentración (1,4%). CONCLUSIONES: La utilización de la línea  celular UMR 106 demostró ser un método conveniente, por su sensibilidad y reproducibilidad para evaluar la biocompatibilidad/citotoxicidad de los biomateriales utilizados. En presencia de los sustratos Ti-PAB-CLH con la mayor concentración de CLH, (1,4%), se observó una importante disminución de la actividad celular.