Estudio de la migración dependiente de Acuaporina 2 (AQP2) en la línea celular renal mpkCCDc14

MENDIVIL, TOMAS; BELTRAMONE, NATALIA; RIVAROLA, VALERIA; FORD, PAULA; DI GIUSTO, GISELA; PIZZONI, ALEJANDRO; CAPURRO, CLAUDIA

La Plata

Congreso; LXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2016

La migración es un proceso que implica cambios del volumen celular: una característica común de las células migrantes es la polarización dentro del plano de movimiento originando un lamelipodio y un cuerpo celular. Nuestros resultados previos, utilizando como modelos experimentales dos líneas celulares de túbulo colector cortical renal (RCCD1) -una transfectada que expresa constitutivamente AQP2 en la membrana apical y otra que no-, mostraron que la presencia de AQP2 favorece la migración celular. El objetivo del presente trabajo consistió en corroborar dichos resultados utilizando otro modelo de células de túbulo colector cortical: mpkCCDc14, que expresa endógenamente AQP2. La ventaja de esta línea radica en la posibilidad de estimularla con cAMP o AVP para producir la incorporación de AQP2 en la membrana apical, tal como ocurre fisiológicamente en los túbulos renales. En este modelo evaluamos la participación de AQP2 en la migración realizando el ensayo de cicatrización de herida (wound healing) y midiendo el % de cicatrización de la monocapa a las 4 hs. Luego, mediante inmunofluorescencia utilizando un marcador de membrana plasmática, realizamos la determinación del volumen celular y de los lamelipodios de las células migrantes. Los resultados del wound healing mostraron que las células estimuladas, con dbAMPc o con AVP, cubren una mayor superficie de herida que las células control no estimuladas (Control: 55 ± 2%, n=13; dbAMPc: 60 ± 2%*, n=11; AVP: 67 ± 2%***, n=8; *p