El estrés hiperosmolar altera la proliferación y la migración de células de trofoblasto de primer trimestre: rol de TRPV-1.

REPPETTI, JULIETA; SZPILBARG NATALIA; MARTINEZ, NORA; BELTRAMONE, NATALIA; DAMIANO, ALICIA E; SEYAHIAN, ABRIL; FARINA MARIANA

La Plata

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2016

Sociedad Argentina de Fisiología

El correcto desarrollo placentario requiere que los procesos de proliferación, diferenciación y apoptosis del trofoblasto estén finamente regulados. Durante la placentación una subpoblación de células del trofoblasto (trofoblasto extravelloso ? EVT) se diferencia y adquiere características migratorias e invasivas.Los receptores de potencial transiente de tipo 1 (TRPV-1) son canales no selectivos de cationes que median principalmente el flujo intracelular de calcio. Estos receptores son sensibles a diversos estímulos como cambios en el pH, la temperatura y la osmolaridad. Recientemente, TRPV-1 ha sido reportado en placenta humana a término, demostrándose su participación en la regulación de la apoptosis placentaria. Nosotros demostramos su expresión anormal en placenta preeclámptica, y en estudios preliminares observamos la expresión de TRPV-1 en células Swan 71 donde evidenciamos que el estrés hiperosmolar incrementa la expresión de este receptor e induce la muerte de las células, proceso que se revierte al bloquear TRPV-1.OBJETIVOS: Evaluar el efecto del estrés hiperosmolar en los procesos de proliferación y migración en células de trofoblasto de primer trimestre Swan71 y analizar el rol de TRPV-1 en dichos procesos.METODOLOGÍA: Utilizamos la línea celular de citotrofoblasto humano de primer trimestre Swan71 que presenta características de EVT. Las células fueron cultivadas en condiciones de isoosmolaridad e hiperosmolaridad, en presencia o ausencia de capzasepina (CPZ - inhibidor de TRPV-1), y posteriormente se evaluaron la proliferación celular por medio del ensayo de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolio (MTT) y diversos parámetros apoptóticos como la fragmentación del ADN por la técnica de ¨laddering¨, el ensayo de Túnel y la expresión de Bax por Western blot. También se determinó la capacidad migratoria de las células a través del ensayo de cierre de herida.RESULTADOS: Al cultivar las células Swan71 en condiciones de hiperosmolaridad evidenciamos una disminución significativa de la proliferación celular (p