CUANTIFICACIÓN DE 2-FENILETANOL EN BIOFILMS DE CANDIDA TROPICALIS MEDIANTE HS-SPME

VELA GUROVIC MARÍA SOLEDAD; AGUSTIN, MARÍA DEL ROSARIO; BRUGNONI, LORENA INÉS

Mendoza

Congreso; XXII Congreso Nacional de Química Orgánica; 2019

Sociedad Argentina de Investigación en Química Organica

En la industria alimentaria la presencia debiofilms genera un serio problemahigiénico-sanitrio, causando pulsos decontaminación difíciles de controlar durante elproceso productivo. Estas estructuras representanuna compleja coexistencia de variasespecies que resulta beneficiosa para susupervivencia frente a agresores externos,logrando subsistencia en las superficies durantelargos periodos de tiempo. Una de lasvarias interacciones posibles para esta red demicroorganismos se da por medio lacomunicación química con moléculas volátiles debajo peso molecular capaces dedifundir en el biofilm. En trabajos anterioreshemos detectado que la molécula másabundante en los biofilms de Candida tropicalis,frecuentemente aislada en la industriajuguera, es el 2-feniletanoL. Este compuesto tienela capacidad de estimular la formación tanto de biofilms monoespecie de C.tropicalis, así como de multiespecies compuesto por otras levaduras cuando esagregado en forma externa a concentraciones superiores a 1mM. En este estudio,desarrollamos un método para detectar y cuantificar 2-feniletanolen células asociadas a superficies de aceroinoxidable mediante Head Space ? Solid Phase Microextraction (HS-SPME).Biofilms maduros (48h) de C.tropicalis sedesarrollaron en jugo de manzana, en viales de vidrio estériles sobre unasuperficie de acero inoxidable previamente esterilizada.Los biofilms se expusieron a la fibradivinilbenceno/carboxeno/polidimetilsiloxano (DVB/CAR/PDMS) y se inyectó en elcromatógrafo gaseoso acoplado a masas. Para la cuantificación se realizó unacurva de calibrado colocando 300 uL de las soluciones del estándar en losviales. Se estudiaron biofilms monoespecie de C. tropicalis y biofilms dualescon Listeria monocytogenes, un microorganismo comúnmente asociado aintoxicaciones alimentarias. La concentración de 2-feniletanol en biofilmsmonoespecie de C. tropicalis fue muy variable, manteniéndose en un rango de 129a 425 µM, mientras que los biofilms duales mostraron valores más estables 170.7± 22.2 µM. Lograr reproducibilidad mediante HS-SPME resulta laborioso, no obstante, se han podidoestimar las concentraciones de este compuesto en el biofilm lo que permiteaproximar valores basales e interpretar resultadosen experimentos donde se ha agregado el volátil enforma exógena. La presencia de L. monocytogenes no altera la producción basalde 2-feniletanol, por lo cual, a estos nivelesel desarrollo de la levadura no se altera, ytampoco se inhibe el patógeno.