IFIS - LITORAL   24734
INSTITUTO DE FISICA DEL LITORAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Diseño de estrategia bioseparativa de Tripsina empleando un copolimero sintético biodegradable derivado de la timina
Autor/es:
E. P. MARIÑO; S. BORTOLATO; D. M. MARTINO; D. ROMANINI
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Simposio; º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos (SAProBio); 2014
Resumen:
La tripsina (TRP) es una endopeptidasa de alto valor comercial puesto que es utilizada en numerosos procesos industriales y biotecnológicos. Esta serin-proteasa rompe los enlaces de las proteínas mediante hidrólisis del enlace peptídico hacia el extremo C-terminal de un residuo de Lys o Arg, para rendir péptidos de menor tamaño o una mezcla de aminoácidos. Esta enzima pancreática de peso molecular 23,3 KDa posee una temperatura de máxima estabilidad de 37°C y un pH óptimo de actividad de 8,2, y curiosamente presenta una alta estabilidad a pH ácidos (2-3).La gran demanda en los últimos años de enzimas por parte de la industria ha impulsado el desarrollo de métodos de purificación de enzimas de baja complejidad y costos. En este sentido, la formación de complejos insolubles entre proteínas y polímeros iónicos ha surgido como una alternativa a aplicarse en distintas áreas de la biotecnología con el fin de contribuir a procesos industriales que involucran a la producción enzimática, la catálisis por inmovilización de enzimas en biorreactores o al desarrollo de nanotecnologías.El copolímero (coP) biodegradable de vinil-bencil-timina (VBT) y vinil-fenil-sulfonato (VPS) es soluble en agua, ambientalmente benigno y posee una alta densidad de carga negativa en un amplio rango de pH, debido a la presencia de grupos sulfónicos en la subunidad VPS.Los coPs empleados en este trabajo fueron sintetizados por investigadores del IFIS Litoral, Universidad del Litoral. Presentan una alta densidad de carga negativa en un amplio rango de pH dada por la presencia de grupos sulfónicos en la subunidad VPS. Este coP presenta la particularidad de formar mallas por entrecruzamiento cuando es irradiado con luz UV. La afinidad del coP por la enzima que permita a la formación de un complejo insoluble y la capacidad del mismo de formar redes por photo-crosslinking permiten proyectar a este sistema como una potencial metodología de purificación y/o inmovilización de enzimas.Para hallar las condiciones óptimas de interacción polímero-proteína se deben estudiar previamente las variables del medio y del sistema como: pH, fuerza iónica, temperatura, concentraciones y relación molar entre ambos componentes.En este trabajo nos hemos propuesto evaluar la capacidad de los polímeros VBT:VPS (1:1, 1:4 y 1:8) de formar complejos insolubles con TRP como punto de partida de una estrategia que pueda aplicarse a escala industrial, particularmente a la bioseparación y la inmovilización de una enzima modelo, la tripsina bovina.
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