Identificación de genes candidatos como biomarcadores de estrés en Caiman latirostris

MARÍA SOLEDAD MOLEÓN; PABLO ARIEL SIROSKI; LOPEZ GONZALEZ EVELYN; GISELA LAURA POLETTA

Esperanza, Santa Fe

Jornada; VIII Jornadas de difusión de la investigación y extensión; 2020

Facultad de Ciencias Veterinarias

Las citoquinas son moléculas multifacéticas que dirigen acciones en la comunicación intercelular y las proteínas de choque térmico (HSP) son las principales chaperonas moleculares que realizan funciones importantes en el plegado/desplegado, la translocación de proteínas y en el ensamblaje/desensamblaje de complejos de proteínas1,2. Varios estudios han indicado que tanto las citoquinas como las HSP responden a diversos factores de estrés y, en particular, las HSP están involucradas en la protección de células y organismos estresados1,3,4. El análisis de la presencia de estos grupos de genes ofrece la posibilidad de ampliar el conocimiento sobre los componentes del sistema inmune de C. latirostris y las posibles respuestas a diversos factores de estrés, en el campo de la ecoinmunología. En el presente estudio, proponemos identificar genes correspondientes a determinadas citoquinas y HSP70 como indicadores potenciales para evaluar la modulación de su expresión en un contexto de estrés. Utilizando la plataforma CoGe (Comparative Genomics), donde se encuentra cargado el genoma secuenciado y mapeado de Caiman latirostris, se recuperaron las secuencias de aminoácidos de las diferentes citoquinas y de HSP70. Se utilizó la herramienta CoGeblast de esta plataforma y se usaron fragmentos o secuencias completas de citoquinas de especies filogenéticamente cercanas (aves, peces y en otros reptiles) previamente publicadas y cargadas en las bases de datos, como NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov). Asimismo, se realizaron alineamientos a través del programa MEGA 7.0 para diseñar oligonucleótidos cebadores específicos. Finalmente, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permitió identificar tres miembros de la familia de interferones (IFN-, IFN-, IFN-k), una quemoquina (IL-8), cuatro miembros de la familia de interleuquinas (IL-6, IL-10, IL-12, IL-12), el factor de necrosis tumoral (TNF) y HSP70 en sangre entera y bazo de C. latirostris. Además, todos los productos de PCR se procesaron en geles de agarosa para verificar los tamaños de los amplicones. Como resultado, la presencia de TNF fue confirmada en sangre, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IFN-, IFN-k en bazo, mientras que HSP70, IFN- y IL-12 fueron encontradas en ambos tejidos. Estos resultados proporcionarán herramientas importantes que permitirán cuantificar estos genes para el monitoreo de situaciones de estrés ambiental que podrían afectar las poblaciones silvestres de caimanes.