“Vacunas a subunidades elaboradas en sistemas de expresión eucariotas y procariotas: obtención de antígenos y optimización de su presentación”. “Levaduras” INTA AEGR 2413

ROMERA SONIA ALEJANDRA

2007-07-01

2009-07-01

Biológica

Sanidad animal-Enfermedades de virus

 Muchas de las proteínas codificadas por los genes de herpesvirus con los cuales estamos trabajando, son glicosiladas. Esto hace que pensemos en un sistema de expresión eucariota que nos permita la obtención de un producto proteico parecido al real, y de esta manera podamos realizar una caracterización fidedigna. Consideramos que la expresión en levaduras es un sistema apropiado para nuestros objetivos, ya que nos permite obtener proteínas con un correcto procesamiento post-transcripcional (glicocilación y plegamiento), en un tiempo compatible con el curso de nuestras investigaciones. Además, este sistema de expresión no está siendo utilizado por ningún otro grupo de investigación dentro de nuestro instituto con lo cual su implementación  aportaría nueva tecnología y una variante más al momento de decidir  expresar proteínas.             Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizada.  Una vez familiarizados con el sistema de expresión en levaduras, podremos dar un paso más e implementar el sistema de doble híbrido de levaduras, lo que nos permitirá estudiar la interacción entre proteínas. Podrá ser estudiada tanto  la interacción de proteínas homólogas como heterólogas. Nos interesa en particular estudiar la interacción entre las proteínas US3 y US9 de BHV-5, ya que, según ha sido reportado para otros herpesvirus relacionados,  US3  es una proteín quinasa, mientras que US9 es un plausible sustrato de US3. Por otro lado, también es de nuestro interés estudiar si  hay interacción y formación de heterodímeros entre las glicoproteína gE de BHV-1 y gI de BHV-5 tal cual ocurre con sus contrapartes homólogas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.  Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.  Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas.             Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizada.  Una vez familiarizados con el sistema de expresión en levaduras, podremos dar un paso más e implementar el sistema de doble híbrido de levaduras, lo que nos permitirá estudiar la interacción entre proteínas. Podrá ser estudiada tanto  la interacción de proteínas homólogas como heterólogas. Nos interesa en particular estudiar la interacción entre las proteínas US3 y US9 de BHV-5, ya que, según ha sido reportado para otros herpesvirus relacionados,  US3  es una proteín quinasa, mientras que US9 es un plausible sustrato de US3. Por otro lado, también es de nuestro interés estudiar si  hay interacción y formación de heterodímeros entre las glicoproteína gE de BHV-1 y gI de BHV-5 tal cual ocurre con sus contrapartes homólogas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.  Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.  Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas.                        Muchas de las proteínas codificadas por los genes con los cuales estamos trabajando, son glicosiladas. Esto hace que pensemos en un sistema de expresión eucariota que nos permita la obtención de un producto proteico parecido al real, y de esta manera podamos realizar una caracterización fidedigna. Consideramos que la expresión en levaduras es un sistema apropiado para nuestros objetivos, ya que nos permite obtener proteínas con un correcto procesamiento post-transcripcional (glicocilación y plegamiento), en un tiempo compatible con el curso de nuestras investigaciones. Además, este sistema de expresión no está siendo utilizado por ningún otro grupo de investigación dentro de nuestro instituto con lo cual su implementación  aportaría nueva tecnología y una variante más al momento de decidir  expresar proteínas.             Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas.             Una vez familiarizados con el sistema de expresión en levaduras, podremos dar un paso más e implementar el sistema de doble híbrido de levaduras, lo que nos permitirá estudiar la interacción entre proteínas. Podrá ser estudiada tanto  la interacción de proteínas homólogas como heterólogas. Nos interesa en particular estudiar la interacción entre las proteínas US3 y US9 de BHV-5, ya que, según ha sido reportado para otros herpesvirus relacionados,  US3  es una proteín quinasa, mientras que US9 es un plausible sustrato de US3. Por otro lado, también es de nuestro interés estudiar si  hay interacción y formación de heterodímeros entre las glicoproteína gE de BHV-1 y gI de BHV-5 tal cual ocurre con sus contrapartes homólogas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.             Muchas de las proteínas codificadas por los genes con los cuales estamos trabajando, son glicosiladas. Esto hace que pensemos en un sistema de expresión eucariota que nos permita la obtención de un producto proteico parecido al real, y de esta manera podamos realizar una caracterización fidedigna. Consideramos que la expresión en levaduras es un sistema apropiado para nuestros objetivos, ya que nos permite obtener proteínas con un correcto procesamiento post-transcripcional (glicocilación y plegamiento), en un tiempo compatible con el curso de nuestras investigaciones. Además, este sistema de expresión no está siendo utilizado por ningún otro grupo de investigación dentro de nuestro instituto con lo cual su implementación  aportaría nueva tecnología y una variante más al momento de decidir  expresar proteínas.             Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas.             Una vez familiarizados con el sistema de expresión en levaduras, podremos dar un paso más e implementar el sistema de doble híbrido de levaduras, lo que nos permitirá estudiar la interacción entre proteínas. Podrá ser estudiada tanto  la interacción de proteínas homólogas como heterólogas. Nos interesa en particular estudiar la interacción entre las proteínas US3 y US9 de BHV-5, ya que, según ha sido reportado para otros herpesvirus relacionados,  US3  es una proteín quinasa, mientras que US9 es un plausible sustrato de US3. Por otro lado, también es de nuestro interés estudiar si  hay interacción y formación de heterodímeros entre las glicoproteína gE de BHV-1 y gI de BHV-5 tal cual ocurre con sus contrapartes homólogas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.             Muchas de las proteínas codificadas por los genes con los cuales estamos trabajando, son glicosiladas. Esto hace que pensemos en un sistema de expresión eucariota que nos permita la obtención de un producto proteico parecido al real, y de esta manera podamos realizar una caracterización fidedigna. Consideramos que la expresión en levaduras es un sistema apropiado para nuestros objetivos, ya que nos permite obtener proteínas con un correcto procesamiento post-transcripcional (glicocilación y plegamiento), en un tiempo compatible con el curso de nuestras investigaciones. Además, este sistema de expresión no está siendo utilizado por ningún otro grupo de investigación dentro de nuestro instituto con lo cual su implementación  aportaría nueva tecnología y una variante más al momento de decidir  expresar proteínas.             Por otro lado, la obtención de proteínas glicosiladas nos permitirá generar sueros de buena calidad, necesarios para la detección del producto proteico en muchas de las técnicas utilizadas.             Una vez familiarizados con el sistema de expresión en levaduras, podremos dar un paso más e implementar el sistema de doble híbrido de levaduras, lo que nos permitirá estudiar la interacción entre proteínas. Podrá ser estudiada tanto  la interacción de proteínas homólogas como heterólogas. Nos interesa en particular estudiar la interacción entre las proteínas US3 y US9 de BHV-5, ya que, según ha sido reportado para otros herpesvirus relacionados,  US3  es una proteín quinasa, mientras que US9 es un plausible sustrato de US3. Por otro lado, también es de nuestro interés estudiar si  hay interacción y formación de heterodímeros entre las glicoproteína gE de BHV-1 y gI de BHV-5 tal cual ocurre con sus contrapartes homólogas. Más allá de los interrogantes que actualmente nos hemos planteado, queda en evidencia que la gran versatilidad de ésta técnica deja abierta las puertas a futuras investigaciones.