IDENTIFICACIÓN DE COMPONENTES IMPLICADOS EN LA FORMACIÓN DE BIOFILM EN ESTAFILOCOCOS COAGULASA NEGATIVOS AISLADOS DE MASTITIS BOVINA

M.E. SREDNIK; E.R. GENTILINI

CABA

Jornada; VI Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2016

Facultad de Ciencias Veterinarias

Introducción: Los estafilococos coagulasa negativos (ECN) son un grupo heterogéneo de bacterias aisladas frecuentemente de mastitis bovina. Los ECN son productores de biofilm. La implicación de biofilm en las infecciones crónicas ha activado un interés creciente en la caracterización de genes involucrados en la formación de estas biopelículas. Existen diversos genes que codifican la síntesis de adhesinas, proteínas de unión a moléculas de la matriz o proteínas implicadas en la formación de biofilm. Estas proteínas de superficie son: la proteína asociada a biofilm Bap que participa en el proceso de unión y colonización a un gran número de superficies, la proteína asociadas a la acumulación Aap; las proteínas que favorecen la unión a los componentes de la matriz extracelular (proteínas de adhesión a fibronectina EmbP, proteínas de adhesión a laminina Eno y proteínas de adhesión al fibrinógeno Fbe), la proteína con función de adhesina/autolisina AltE, y el operón ica (icaA) que codifica para la maquinaria que sintetiza el polisacárido de adhesión intercelular (PIA). La capacidad de formación de biofilm proporciona la adherencia de las células a una superficie y la acumulación de capas múltiples para formar grupos de células. Estos agregados no son susceptibles a la fagocitosis y son resistentes a ciertos antibióticos, un factor muy importante para la persistencia de la infección y reacción inflamatoria. Materiales y Métodos: Se analizaron n=90 ECN, provenientes de leches mastíticas previamente identificados por RFLP-PCR. Extracción de ADN y PCR: Se realizaron 7 PCR de acuerdo con Tremblay y col. (2013). Resultados: La mayoría de los aislamientos resultaron positivos al menos a uno de los 7 genes analizados, sólo 10 aislamientos resultados negativos a los 7 genes. En total, 3 aislamientos (3.3%) resultaron positivos al gen icaA y 3 aislamientos (3.3%) al gen bap. Sólo 3 aislamientos (3.3%) fueron positivos al gen aap siendo detectado solamente en la especie S. epidermidis. 12 (13.3%) aislamientos resultaron positivos al gen fbe. La presencia del gen atlE entre los aislamientos fue mayor, 24 (26.7%), al igual que el gen embP, 23 (25.6%) positivos. La mayoría de los aislamientos (n=79) resultaron positivos al gen eno (84%). Conclusión: Se detectaron aislamientos de ECN que portan genes relacionados a la producción de biofilm en diferente proporción. La correcta identificación, detección factores de resistencia y de virulencia, y la habilidad de formación de biofilm, es esencial para comprender la participación de los ECN en las infecciones intramamarias, y tomar decisiones apropiadas para la terapéutica y el manejo de las vacas en ordeñe.