Participación de las especies reactivas del oxígeno durante la maduración y activación in Vitro de ovocitos bovinos

VANINA PEREYRA; PABLO RODRIGUEZ; ELIZABETH BREININGER

Buenos Aires

Jornada; Cuarta Jornada de Jóvenes Investigadores en Ciencias Veterinarias 2014; 2014

Subsecretaría de Ciencia y Técnica - INITRA, Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA

PARTICIPACION de lactato deshidrogenasa en LA CAPACITACION Y LA REACCION ACROSOMAL DE ESPERMATOZOIDES porcinoS.   PEREYRA V; RODRIGUEZ PC, BREININGER E. Cátedra de Química Biologica, INITRA, INPA, Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA     El objetivo de este trabajo fue determinar la actividad de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH; 1.1.1.27) y estudiar su participación en los procesos de capacitación y reacción acrosomal (RA) en espermatozoides porcinos. Esta enzima está involucrada en la generación de la energía necesaria para los procesos metabólicos del espermatozoide. En la especie porcina existen relativamente pocos estudios que demuestren a un nivel bioquímico la relación existente entre la actividad enzimática y los procesos conducentes a la adquisición de la capacidad fecundante. La actividad de LDH se determinó espectrofotométricamente a 340 nm durante 3 minutos, a 37 °C. La unidad enzimática (UE) se definió como la cantidad de enzima LDH que cataliza la oxidación de 1 µmol de NADH/minuto. La actividad específica se expresó en UE/mg proteína presente. Los porcentajes de capacitación espermática y la RA se determinaron, en presencia y ausencia de diferentes concentraciones de oxamato (inhibidor competitivo de LDH; 10, 25 y 50 mM) en el medio de incubación, por las técnicas de cloro tetraciclina y microscopía DIC combinada con azul tripán, respectivamente. Se evaluaron la vitalidad por la técnica de eosina/nigrosina y la movilidad por microscopía óptica en platina termostatizada. La actividad de LDH fue 3,40±1,21 UE/1010 espermatozoides mientras que la AE fue de 5,02±1,66 UE/mg proteínas/1010 espermatozoides. La inclusión del inhibidor competitivo de la enzima disminuye los niveles de capacitación y reacción acrosomal. Los resultados obtenidos hasta el momento indicarían que existe actividad de la enzima LDH en el espermatozoide porcino y que esta enzima participa en la capacitación y la RA, siendo indicio de la importancia de la vía fermentativa en esta célula.