Participación de succinato deshidrogenasa en la capacitación y reacción acrosomal de espermatozoides porcinos

PEREYRA V; DUBOIS D; RODRIGUEZ PC; SATORRE MM; BREININGER E

Congreso; XV Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología; 2013

El objetivo de este trabajo fue determinar la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa (SDH; 1.3.5.1) y estudiar su participación en los procesos de capacitación y reacción acrosomal (RA) en espermatozoides porcinos. La actividad de SDH se determinó espectrofotométricamente a 600 nm durante 2 minutos, a 37 °C. La unidad enzimática se definió como la cantidad de enzima SDH que cataliza la reducción de 1 µmol de DCPIP/minuto. La capacitación espermática y la RA se determinaron, en presencia y ausencia de malonato (inhibidor competitivo de SDH; 1, 5 y 10 mM), por las técnicas de CTC y microscopía DIC combinada con azul tripán, respectivamente. Se evaluaron la vitalidad por la técnica de eosina/nigrosina y la movilidad por microscopía óptica en platina termostatizada. Los datos de actividad enzimática (con y sin malonato) fueron analizados con la prueba de t de Student apareada. Los resultados de capacitación y RA fueron evaluados por el Análisis de Varianzas (ANOVA) y el test de Bonferroni. La actividad de SDH en ausencia del inhibidor fue de 0,44±0,16 UE/1010 espermatozoides y en presencia de malonato fue de 0,05±0,01 UE/1010 espermatozoides. Tanto la capacitación como la reacción acrosomal disminuyeron significativamente por el agregado de 5 mM de malonato, sin afectar la vitalidad ni la movilidad espermática. Nuestros resultados demuestran la actividad de la enzima SDH y su participación en la capacitación y la RA de espermatozoides porcinos, indicando que el ciclo de Krebs es fundamental para la generación de ATP para dicho procesos.