Adsorción de zearalenona por pared celular de levaduras de origen comercial.

PEREYRA C.,; CAVAGLIERI L.R; CHIACCHIERA S.M.; MAGNOLI C.; DALCERO A.M.; ROSA C.A. DA R

Florianópolis, Santa Catarina, Brasil

Congreso; IV Congresso Latino-americano y X Congreso Brasileiro de Higienistas de Alimentos.; 2009

La zearalenona (ZEA) es un metabolito secundario producido por un numero de especies de Fusarium incluyendo F. culmorum y F. graminearum (Glen y col., 2007). Se ha documentado en varias especies de animales que a bajas dosis se ha visto incrementada la talla de la glándula mamaria y glándulas reproductivas. Los cerdos parecen ser los más susceptibles, presentando inflamación de la vulva y prolapsos vaginales y rectales además de alargamiento uterino y atrofia ovárica (Newman, 1998). Uno de los métodos más eficaces para controlar riesgos de micotoxinas en la cría de animales se basa en el uso de materiales específicos que adsorben las micotoxinas. Estas sustancias secuestran las toxinas en el tracto gastrointestinal formando complejos insolubles que son eliminados en las heces. Así, al reducir la biodisponibilidad de las micotoxinas disminuyen sus efectos tóxicos. En particular se utilizan paredes celulares de levaduras (PL), constituidas principalmente por polisacáridos naturales del tipo b-glucanos y manano oligosacáridos. Este tipo de compuestos se incorpora como aditivo alimentario en la industria  la producción animal desde la década del 90. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la eficacia de adsorber ZEA por una pared de levadura (PL) de origen comercial. El adsorbentes utilizado fue una pared de levaduras de origen comercial (Safmannan® Saf do Brasil, Division Agropecuaria) fue resuspendida en buffer a pH 2. La solución buffer pH 2 se preparó colocando 50 mL de una solución de cloruro de potasio (KCl) 0,2 M al que se le agregó 13 mL de una solución de ácido clorhídrico (HCl) 0,2 M. La solución de ZEA se resuspendió en acetonitrilo 10 mg de ZEA (Sigma) hasta obtener una solución de 2 mg/mL. A partir de esta solución la toxina fue diluida hasta obtener las concentraciones necesarias en cada ensayo. Para el ensayo de adsorción la pared de levadura (50 µg/mL), se colocó en cada tubo de ensayo en presencia de 2, 6, 10, 20 y 50 µg/mL. Los tubos se introdujeron en un baño termostático a 37ºC con agitación mecánica durante 30 min. Al cabo de la experiencia se centrifugaron los tubos durante 20 min a 14000 rpm., se tomó el sobrenadante, se evaporó a sequedad con corriente suave de N2 gaseoso. Cada ensayo se realizó por duplicado y se incluyeron controles del adsorbente y de la toxina. Para la cuantificación de ZEA los extractos fueron resuspendidos en 250 µL de fase móvil, metanol:agua (70:30) e inyectados en el HPLC siguiendo la metodología de Cerveró y col. (2007). La inspección visual nos muestra una isoterma tipo S, que se ajustó siguiendo un modelo de Hill, que explica la forma de la isoterma considerando la adsorción cooperativa entre la toxina y el adsorbente. Dentro de los parámetros de ajuste más importantes debemos considerar un valor de saturación de 0,0356 ± 0,0007 mg ZEA ads /g de pared y una constante de asociación por sitio de 8,9 ± 0,2 (ng/mL)-1. Los valores de los parámetros son del orden de los obtenidos por Yiannikouris y col. (2004) para diferentes fracciones de PL. Numerosos estudios in vivo acreditan la acción detoxificante de estos adsorbentes, sin embargo, dada la variabilidad de la composición de las PL con la forma de producción de la biomasa hace necesaria la evaluación individual de las mismas. La ZEA se pega eficientemente a las PL a través de un mecanismo de atracción cooperativa. Este resultado muestra la potencialidad de la PL para prevenir los efectos tóxicos provocados por la ingesta de ZEA.